文献

J-GLOBAL ID：201802274909074567   整理番号：18A0672510

レンチウイルスベクターによる色素上皮由来因子遺伝子導入によるヒト臍帯間葉系幹細胞のトランスフェクションに関する研究【JST・京大機械翻訳】

Lentiviral transfection of pigment epithelial derived factor gene into human umbilical cord mesenchymal stem cells

著者 (8件)： Duan Hongtao (300020,天津市眼科医院天津医科大学眼科臨床学院天津眼科学与視覚科学重点実験室天津市眼科研究所) ,  Chen Song (300020,天津市眼科医院天津医科大学眼科臨床学院天津眼科学与視覚科学重点実験室天津市眼科研究所) ,  Dong Meng (300020,天津市眼科医院天津医科大学眼科臨床学院天津眼科学与視覚科学重点実験室天津市眼科研究所) ,  Wang Yuexin (300020,天津市眼科医院天津医科大学眼科臨床学院天津眼科学与視覚科学重点実験室天津市眼科研究所) ,  Kong Jiahui (300020,天津市眼科医院天津医科大学眼科臨床学院天津眼科学与視覚科学重点実験室天津市眼科研究所) ,  Song Jian (300020,天津市眼科医院天津医科大学眼科臨床学院天津眼科学与視覚科学重点実験室天津市眼科研究所) ,  Li Zedong (300020,天津市眼科医院天津医科大学眼科臨床学院天津眼科学与視覚科学重点実験室天津市眼科研究所) ,  Wang Jiming (300020,天津市眼科医院天津医科大学眼科臨床学院天津眼科学与視覚科学重点実験室天津市眼科研究所)
資料名： Zhonghua Yandibing Zazhi  (Zhonghua Yandibing Zazhi)
巻： 33  号： 6  ページ： 621-625  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2304A  ISSN： 1005-1015  CODEN： ZYAZEE  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:色素上皮由来因子(PEDF)遺伝子を持つレンチウイルス(LV)ベクターを構築し、ヒト臍帯間葉系幹細胞(hUCMSCs)にトランスフェクションし、遺伝子修飾PEDF-間葉系幹細胞の実行可能性を検討する。方法:遺伝子組み換え法を用いてLV-PEDFベクターを構築し、そのLV力価を測定し、感染の複数(MOI)値が10、30、50のLVを体外でhUCMSCsにトランスフェクションし、それに応じて相応のMOI値実験群に分けた。PEDF遺伝子を含まない同じMOI値を持つ組換えLVベクター[LV-緑色蛍光蛋白(GFP)]をhUCMSCsにトランスフェクションし、これにより相応のMOI値対照群に分けた。トランスフェクション効率を蛍光顕微鏡で観察し,トランスフェクション効率を計算した。細胞免疫蛍光法,免疫細胞化学法,リアルタイム定量的ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)を用いて,50MOIの実験群と50MOIの対照群の細胞におけるPEDFと血管内皮成長因子(VEGF)の発現を検出した。結果:制限酵素消化及び遺伝子配列決定により、LVベクターの構築に成功したことが証明された。96時間のトランスフェクションの後,50MOIの実験群において,GFPの発現は,72.1%のトランスフェクション効率で観察された。蛍光顕微鏡検査により、トランスフェクション後96時間、50MOI実験群の細胞質PEDF、VEGF発現が増強されたことが分かった。光学顕微鏡観察により、トランスフェクション後96h、50MOIの実験群の細胞質のPEDF発現は比較的に低く、VEGF発現は比較的に強く、RT-PCRの測定結果により発見された。50MOIの実験群と50MOIの対照群の細胞におけるPEDF mRNAの相対的発現は,それぞれ0.170±0.028と0.015±0.007であった。VEGF mRNAの相対的発現は,それぞれ0.265±0.022と0.285±0.049であった。2つの群におけるPEDF mRNAの相対的発現は,統計的有意差があった(F=70.29,P<0.001)。VEGF mRNAの相対的発現は,統計学的に有意でなかった(F=9.57,P>0.05)。結論:PEDF遺伝子を発現するLV発現ベクターを成功裏に構築し、hUCMSCsにおいてPEDF遺伝子を過剰発現させた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ベクター ,  mRNA ,  光学顕微鏡法 ,  *間葉系幹細胞 ,  蛍光抗体法 ,  VEGF ,  *トランスフェクション ,  PCR法 ,  タンパク質 ,  *遺伝子 ,  細胞質 ,  *ヒト ,  蛍光顕微鏡
準シソーラス用語： 過剰発現 ,  遺伝子組換 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Vascular endothelial growth factors ,  Mesenchymal stem cells ,  Lentivirus infections ,  Cells ,  cultured

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (8件)： レンチウイルスベクター ,  色素上皮由来因子 ,  遺伝子導入 ,  ヒト ,  臍帯 ,  間葉系幹細胞 ,  トランスフェクション ,  研究