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J-GLOBAL ID:201802274950008355   整理番号:18A1134368

エキソヌクレアーゼIII支援カスケード多重増幅蛍光DNA機械による活性ウラシル-DNAグリコシラーゼの高感度検出【JST・京大機械翻訳】

Sensitive detection of active uracil-DNA glycosylase via an exonuclease III-assisted cascade multi-amplification fluorescence DNA machine
著者 (5件):
資料名:
巻: 271  ページ: 9-14  発行年: 2018年 
JST資料番号: T0967A  ISSN: 0925-4005  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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ウラシル-DNAグリコシラーゼ(UDG)はいくつかのヒト疾患に密接に関連しているので,UDG活性のモニタリングと検出は臨床診断と機能研究において非常に重要である。ここでは,エキソヌクレアーゼIII(Exo III)の助けを借りて,活性UDGアッセイのための高感度カスケード多重増幅蛍光戦略を実証した。UDGの開裂反応の下で,特異的ウラシル塩基を含む二本鎖DNAは二つの解離性一本鎖DNAに分離し,それはExo III支援二重サイクルを発射するために二つの環状ヘアピンプローブと別々にハイブリッド化した。フルオロフォアと消光基で修飾したヘアピンDNAを信号プローブとして用いた。二重サイクルの後に,無数の同じ短いDNAフラグメントを,シグナルプローブとハイブリッド化するために発生させ,新しいExo III支援環状増幅を開始し,発蛍光団のみを運ぶ多数の一本鎖DNAを放出した。したがって,検出システムの蛍光強度は強化された。本研究は,UDG活性を検出するために2.4×10~4U/mLの低い検出限界を得た。そして,それはHeLa細胞溶解物の分析によって満足できる選択性と良好な実用性を実行し,UDG活性の臨床診断と機能研究のための潜在的方法を提供した。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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JSTが定めた文献の分類名称とコードです
核酸一般  ,  分析機器 

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