抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【背景】3T3-L1前脂肪細胞系は,in vitro脂肪形成研究のための有益なモデルを表すが,初代培養細胞は,特定のヒトまたは動物の代謝表現型を理解するためにしばしば必要である。大型哺乳類種由来のin vitro培養前脂肪細胞により示されるように,初代培養細胞は3T3-L1細胞系のそれと異なる特異的脂肪生成分化条件を必要とする。これらの条件は種特異的で,最適化段階を必要とする。しかしながら,げっ歯類への代替種を用いて初代前脂肪細胞を識別する効率的なプロトコルは少ない。ヒツジは,胎児の生物学および健康および疾患研究の発生起源に対する,可能でしい動物モデルを代表する。本研究では,初代胎児と成体ヒツジ前脂肪細胞を効率的に区別するための最初の詳細な手順を提示する。【方法】胎児と成体ヒツジの脂肪と皮膚組織の収穫,前脂肪細胞と線維芽細胞の分離,増殖,および新しい脂肪生成分化プロトコルの標準化と最適化。検証目的のために市販細胞株(3T3-L1とNIH-3T3)を使用した。オイルレッドO染色と遺伝子発現を用いて,脂肪生成分化を検証した。ANOVAとフィッシャーの正確な試験を用いて,統計的有意性を測定した。【結果】最適化された脂肪生成分化法は,2から8日までの長い脂肪生成カクテル曝露時間,より高いインシュリン濃度,およびペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ(PPARγ)アゴニスト,ロシグリタゾンによる補給を含んだ。このプロトコルは胎児および成体前脂肪細胞の両方に対して最適化された。【結論】著者らのプロトコルは胎児および成体ヒツジ前脂肪細胞の脂肪生成分化の成功を可能にする。この研究は,3T3-L1細胞系と比較して,胎児ヒツジ前脂肪細胞が分化カクテルへのより長い曝露と,末端分化相を介したIMBX,デキサメタゾンおよび/またはPPARγアゴニストロシグリタゾンの必要性を必要とすることを示す。それらは脂質蓄積を増強し,ヒト初代前脂肪細胞に類似する分化時に高インシュリン濃度を必要とし,PPARγアゴニスト補給もヒツジ脂肪生成分化に必要である。本研究は,脂肪生成分化に対する種特異的差異要件と,比較脂肪細胞生物学を研究するための標準化方法を開発する必要性を強調する。Copyright 2018 The Author(s). All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】