抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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目的;非小細胞肺癌(NSCLC)細胞の上皮間葉転換(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)及び遷移浸潤に対するCTENの影響及びそのメカニズムを検討する。方法;高発現プラスミドpcmv-CTENと対照プラスミドpcmvを,リポフェクタミン2000を用いてA549細胞にトランスフェクトし,高発現群と対照群に分けた。CTEN,TGF-β1およびEMTのmRNAおよび蛋白質レベルを,それぞれ定量的PCRおよびウエスタンブロット法によって検出し,細胞移動および浸潤能力を,細胞スクラッチ試験およびTranswell実験によって検出した。Lipofectamine2000を用いて,TGF-β1高発現プラスミドpcmv-TGF-β1と対照プラスミドpcmvをA549細胞にトランスフェクションし,高発現群と対照群に分けた。TGF-β1およびEMTのmRNAおよび蛋白質レベルを,それぞれ定量的PCRおよびウエスタンブロットによって検出し,細胞移動および浸潤能力を,細胞スクラッチ試験およびTranswell実験によって検出した。Lipofectarnine2000を用いて,TGF-β1干渉プラスミドsiRNAとTGF-β1のsiRNAをA549細胞にトランスフェクションし,それぞれ干渉群と対照群に分けた。TGF-β1 mRNAと蛋白質の発現を,それぞれ定量的PCRとウエスタンブロット法によって検出した;そして,2つの群の細胞におけるTGF-β1mRNAと蛋白質の発現は,ウエスタンブロット法によって検出した。次に,リポフェクタミン2000を用いて,CTEN高発現プラスミドpcmv-CTENをヒトの2つの細胞にトランスフェクトし,CTENとEMTのmRNAと蛋白質レベルを,それぞれ定量的PCRとウエスタンブロットによって検出した;。 Eca-CTENの発現を,それぞれ定量化PCRとウェスタンブロット法によって検出した。細胞移動と浸潤能力を,細胞スクラッチ試験とTranswell実験によって検出した。結果;対照群と比べ、高発現CTEN群のTGF-β1発現が上昇し、上皮マーカー分子の発現が低下し、間質マーカー分子の発現が上昇し、EMTの発生を促進し、細胞の移動と下室へ浸潤する細胞数が明らかに増加した。対照群と比較して,TGF-β1群における上皮標識分子の発現は減少し,間質マーカー分子の発現は増加し,細胞の移動と浸潤の下での細胞数は明らかに増加した。A549細胞におけるTGF-β1の過剰発現は,CTENを過剰発現させ,EMTの促進作用を減少させ,細胞移動と侵入能力の増加を明らかに減少させた。結論;CTENは,A549細胞におけるEMTと遊走を促進することができ,TGF-β1と関連している可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】