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J-GLOBAL ID：201802276761282414   整理番号：18A2120663

2種類のHPV遺伝子チップ品質管理標準品プラスミドの構築【JST・京大機械翻訳】

Construction of Two Quality Control Standard Plasmids for HPV Gene Chips

著者 (8件)： Lan Jinzhi (貴州医科大学基礎医学院,貴州貴陽550004;貴州医科大学) ,  Liu Yang (貴州医科大学基礎医学院,貴州貴陽,550004) ,  Xu Shu (貴州医科大学臨床医学院,貴州貴陽,550004) ,  Zhang Jinjuan (貴州医科大学基礎医学院,貴州貴陽,550004) ,  Wang Huan (貴州医科大学基礎医学院,貴州貴陽,550004) ,  Xiao Jun (貴州医科大学基礎医学院,貴州貴陽,550004) ,  Jiang Yinhui (貴州医科大学貴州省分子生物学重点実験室,貴州貴陽,550004) ,  Chen Tengxiang (貴州医科大学基礎医学院,貴州貴陽,550004)
資料名： Guizhou Yike Daxue Xuebao  (Guizhou Yike Daxue Xuebao)
巻： 43  号： 8  ページ： 894-898,903  発行年： 2018年 
JST資料番号： C3568A  ISSN： 2096-8388  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)HPV26とHPV73亜型の単クローン標準品プラスミドを構築し、HPV遺伝子チップ調製の品質管理に用いる。方法;HPV26とHPV73の2種類のサブタイプ感染の臨床子宮頸部の脱落細胞サンプルを収集し、PCR増幅サンプル中のHPVのLi領域のDNA断片を抽出し、アガロースゲル電気泳動でDNAの分子量の大きさを検証した。遺伝子クローニング技術を用いて、L1領域のDNA断片を線形化したpMD18-Tプラスミドベクターに連結し、アガロースゲル電気泳動を行い、プラスミドの連結反応を行い、構築したHPVプラスミドを大腸菌に形質転換し、プラスミドを配列決定し、挿入DNA配列の正確性を検証した。HPVサブタイプの単クローンプラスミドのL1領域の特異的DNA断片を検査標準品とし、この標準品と本課題グループが作成したHPVタイピング遺伝子チップとのハイブリダイゼーション反応を行い、HPV26とHPV73部位の呈色情況を検査・測定した。遺伝子チップHPV26とHPV73プローブの特異性とスポット品質を評価した。結果;HPV26とHPV73のDNAを感染したHPV患者の子宮頸部の脱落細胞から抽出して,L1領域のDNAをPCRによって増幅して,DNA断片をpMD18-Tベクターに結合させた。電気泳動の結果,結合後のプラスミドサイズは予想値と一致し,遺伝子配列決定により挿入されたHPV26とHPV73のDNA断片配列が正しいことが分かった。HPV26とHPV73のL1領域の特異的DNA断片をPCRにより増幅し,分子量は予想値と一致した。ハイブリダイゼーション反応は,HPV26とHPV73プローブの特異性と再現性が良好で,プローブの感度が100%で,特異性が100%であることを示した。結論:HPV26とHPV73の単クローンターゲットDNA標準品は、HPV遺伝子チップの品質管理に応用できる。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 感染 ,  患者 ,  電気泳動 ,  分子ハイブリダイゼーション ,  *品質管理 ,  *品質 ,  クローン ,  *プラスミド ,  ベクター ,  大腸菌 ,  PCR法 ,  プローブ ,  再現性 ,  DNA【核酸】
準シソーラス用語： 特異性 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (3件)： ウイルス感染の生理と病原性  (EG04042Y) ,  腫ようの化学・生化学・病理学  (GE02030N) ,  女性生殖器と胎児の腫よう  (GS04000K)

タイトルに関連する用語 (6件)： HPV ,  遺伝子チップ ,  品質管理 ,  標準品 ,  プラスミド ,  構築