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J-GLOBAL ID：201802276882444181   整理番号：18A0966794

膜蛋白質の代替宿主としてのPseudomonas stutzeri【JST・京大機械翻訳】

Pseudomonas stutzeri as an alternative host for membrane proteins

著者 (3件)： Sommer Manuel (Max Planck Institute of Biophysics, Frankfurt am Main, Germany) ,  Xie Hao (Max Planck Institute of Biophysics, Frankfurt am Main, Germany) ,  Michel Hartmut (Max Planck Institute of Biophysics, Frankfurt am Main, Germany)
資料名： Microbial Cell Factories (Web)  (Microbial Cell Factories (Web))
巻： 16  号： 1  ページ： 157  発行年： 2017年 
JST資料番号： U7049A  ISSN： 1475-2859  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 【背景】膜蛋白質に関する研究は,しばしば関心のある蛋白質の不十分な収率によって妨げられる。いくつかの原核生物宿主は生産プラットフォームとしてのそれらの適用性について試験されているが,まだ大腸菌は最も一般的に使用されているものである。それにもかかわらず,いくつかの場合,大腸菌以外の宿主は,ある種の標的蛋白質に対してより適切であることが示されている。【結果】著者らは,単一プラスミドに基づくアプローチを用いて,膜蛋白質の異種生産のための発現システムを開発した。gammaproteobacterium Pseudomonas stutzeriを新しい生産宿主として用いた。著者らは,実験室でのその取り扱いに重要ないくつかの基本的微生物学的特徴を調べた。生物安全性レベルに属する生物は,ヒト病原体緑膿菌の密接な相対である。Pseudomonas stutzeriはその成長と培養条件に関して大腸菌に匹敵する。いくつかの有効な抗生物質を同定し,プラスミド変換のプロトコルを確立した。著者らは,標的蛋白質のクローニング,最良の生産条件のための小規模スクリーニング,および最終的にミリグラムの範囲での大規模生産を含むワークフローを提示する。GFP折畳み分析を蛋白質折畳み状態の迅速分析に用いた。要約すると,36の異種標的蛋白質のうち,20は高収率で生産された。さらに,緑膿菌由来の8つの輸送体が高収率で得られた。Salmonella entericaから高純度へのGluconateの蛋白質生産と精製のアップスケーリングを実証した。結論:Pseudomonas stutzeriは大腸菌に匹敵する成功率を持つ膜蛋白質の代替生産宿主である。しかしながら,いくつかの蛋白質はP.stutzzeriにおいて高収率で生産されたが,大腸菌においては生産されず,その逆も生じた。従って,P.stutzzeriは膜蛋白質に対する有用な生産宿主のスペクトルを拡大し,高度に生産された蛋白質に対する成功率を増加させる。新しいpL2020ベクターを用いて,両宿主を並行して試験するための追加クローニングは必要としない。Copyright 2018 The Author(s). All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ベクター ,  スクリーニング ,  プラスミド ,  ヒト ,  培養条件 ,  抗生物質 ,  大腸菌 ,  *膜タンパク質 ,  緑膿菌 ,  病原体 ,  安全性 ,  *Pseudomonas ,  *タンパク質
準シソーラス用語： 標的蛋白質 ,  *Pseudomonas stutzeri , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Pseudomonas ,  膜蛋白質 ,  過剰生産 ,  生産ホスト

分類 (3件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  生体膜一般  (EF04010G) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

引用文献 (58件)：

• Trends Microbiol; A phylum level perspective on bacterial cell envelope architecture; IC Sutcliffe; 18; 2010; 464-470; 10.1016/j.tim.2010.06.005; CR1;
• Cold Spring Harb Perspect Biol; The bacterial cell envelope; TJ Silhavy, D Kahne, S Walker; 2; 2010; a000414; 10.1101/cshperspect.a000414; CR2;
• Protein Sci; Genome-wide analysis of integral membrane proteins from eubacterial, archaean, and eukaryotic organisms; E Wallin, G Heijne; 7; 1998; 1029-1038; 10.1002/pro.5560070420; CR3;
• Lancet; Cystic fibrosis; BP O’Sullivan, SD Freedman; 373; 2009; 1891-1904; 10.1016/S0140-6736(09)60327-5; CR4;
• Annu Rev Biophys Biomol Struct; Disease-related misassembly of membrane proteins; CR Sanders, JK Myers; 33; 2004; 25-51; 10.1146/annurev.biophys.33.110502.140348; CR5;

タイトルに関連する用語 (2件)： 膜蛋白質 ,  Pseudomonas