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J-GLOBAL ID：201802278467863093   整理番号：18A2132021

ヒト天然抗TNF-αScFv抗体のスクリーニング及び性質分析【JST・京大機械翻訳】

Screening and characterizing anti-TNF-α antibody from human naive ScFv phage display library

著者 (8件)： Qiao Yuling (蘭州生物制品研究所有限責任公司第四研究室 甘粛省疫苗工程技術研究中心,甘粛蘭州,730046) ,  Lu Weijia (蘭州生物制品研究所有限責任公司第四研究室 甘粛省疫苗工程技術研究中心,甘粛蘭州,730046) ,  Chen Jijun (蘭州生物制品研究所有限責任公司第四研究室 甘粛省疫苗工程技術研究中心,甘粛蘭州,730046) ,  Qin Haiyan (蘭州生物制品研究所有限責任公司第四研究室 甘粛省疫苗工程技術研究中心,甘粛蘭州,730046) ,  Wang Jianfeng (蘭州生物制品研究所有限責任公司第四研究室 甘粛省疫苗工程技術研究中心,甘粛蘭州,730046) ,  Zhang Chao (蘭州生物制品研究所有限責任公司第四研究室 甘粛省疫苗工程技術研究中心,甘粛蘭州,730046) ,  Xiong Ying (蘭州生物制品研究所有限責任公司第四研究室 甘粛省疫苗工程技術研究中心,甘粛蘭州,730046) ,  Mao Xiaoyan (蘭州生物制品研究所有限責任公司第四研究室 甘粛省疫苗工程技術研究中心,甘粛蘭州,730046)
資料名： Weishengwu Xue Mianyi Xue Jinzhan  (Weishengwu Xue Mianyi Xue Jinzhan)
巻： 46  号： 2  ページ： 20-26  発行年： 2018年 
JST資料番号： C3784A  ISSN： 1005-5673  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:ヒト腫瘍壊死因子(humantumournecrosisfactor-α,humanTNF-α)を標的抗原とする。構築したヒト天然単鎖抗体(single-chainantibodyfragment,ScFv)ファージ抗体ライブラリーから対応するScFv抗体をスクリーニングした。その中和活性を測定し、動力学定数(kineticdissociation,KD)を測定した。方法:TNF-αグラジエント希釈後、免疫管に包まれ、ヒト天然ScFvファージ抗体ライブラリーに対して3回の吸着-溶出-増幅の濃縮選別を行い、TNF-αモノクローナルファージ抗体顆粒を作製し、ELISA試験により陽性クローンを選別し、配列決定し、分析した。陽性抗体をpET-26b発現ベクターにサブクローニングし,NiSepharose6FastFlowで精製した。選別したScFvの中和活性をMTT比色法で検証し,中和抗体のKDを測定した。結果:3回のスクリーニングを通じて、18個の正確な抗体アミノ酸配列が得られ、その原核発現及び精製後に得られた6株の可溶性発現の抗TNF-αScFvに対して中和活性検証を行い、そのうち中和活性を有する4株ScFv抗体に対してKDを測定した。【結語】4つの抗ヒトTNF-αのScFv中和抗体をヒトの天然ScFvファージ抗体ライブラリーからスクリーニングし,そのうち1株のScFv抗体のKDは4.80×10-8であり,細胞毒性は48.9%であった。薬用レベルの抗ヒトTNF-α中和抗体の研究開発要求を達し、全分子抗体薬物の構築及び安定細胞株の選別に一定の基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 中性化 ,  抗原 ,  吸着 ,  *ヒト ,  ELISA ,  アミノ酸配列 ,  細胞毒性 ,  バクテリオファージ ,  *TNFα ,  可溶性 ,  中和抗体 ,  クローン ,  *抗体
準シソーラス用語： 抗体ライブラリー ,  一本鎖抗体 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (3件)： 抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  抗原・抗体・補体一般  (ED04010A) ,  抗原・抗体・補体の生化学  (ED04020L)

タイトルに関連する用語 (6件)： ヒト ,  scFv ,  抗体 ,  スクリーニング ,  性質 ,  分析