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J-GLOBAL ID:201802279911455360   整理番号:18A0101793

クリプトスポリジウムにおけるABC2遺伝子のクローニングと栄養物質輸送についての研究は,この研究において重要な役割を果たす。【JST・京大機械翻訳】

Cloning expression and nutrient transportation of Cryptosporidium andersoni ATP-binding cassette 2 gene
著者 (6件):
資料名:
巻: 22  号: 10  ページ: 97-102  発行年: 2017年 
JST資料番号: C2277A  ISSN: 1007-4333  CODEN: ZNDXAA  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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クリプトスポリジウム(Cryptosporidium andersoni)ATP結合カセット輸送タンパク質遺伝子(CaA BC2)が栄養物質に対する輸送機能を検討するために、Antheridium胞子虫のゲノムをテンプレートとして用いた。CaABC2遺伝子の特異的プライマーを設計し、PCR増幅を行い、CaABC2遺伝子を獲得した。真核生物発現プラスミドpEGFP-C1にクローン化された組換えプラスミドCaABC2遺伝子を再結合し,組換え型真核生物発現ベクターpEGFP-C1-CaABC2を構築した。組換え型プラスミドpEGFP-C1-CaABC2を,リポフェクタミン2000によってマウス腸上皮細胞(Intestinal epithelial cells,IEC)に形質移入した。総コレステロール,還元型グルタチオン,グルコース,およびアルカリ性ホスファターゼに及ぼすIECの影響を,異なる群において検出した。結果は以下を示した。778bpのCaABC2遺伝子が増幅され,配列解析は予想されたフラグメントのサイズと一致していることが示された。組換え型真核細胞プラスミドpEGFP-C1-CaABC2をマウスのIEC細胞にトランスフェクションした後、トランスフェクション後の対照群とトランスフェクション群のIECは緑色蛍光を有することが観察された。細胞内液において,トランスフェクション群,対照群およびブランク群における総コレステロール濃度は,それぞれ15.99±0.12,11.80±0.35および12.43±0.16mmol/Lであった。還元型グルタチオンの濃度は,それぞれ15.24±0.44,10.48±0.35および11.04±0.75mmol/Lであった。細胞外液において,トランスフェクション群,対照群およびブランク群の総コレステロール濃度は,それぞれ10.67±0.17,14.82±0.06および15.84±0.17mmol/Lであった。還元型グルタチオンの濃度は,それぞれ10.20±0.79,14.60±0.45および15.60±2.50mmol/Lであった。トランスフェクション群の総コレステロール、還元型グルタチオンの濃度はいずれも空白群と対照群より著しく大きく(P<0.05)、細胞外液中では、トランスフェクション群の総コレステロール、還元型グルタチオンの濃度はいずれも空白群と対照群より顕著に小さかった(P<0.05)。細胞内液と外液において、空白群と対照群の総コレステロール、還元型グルタチオンの濃度にはいずれも有意差が認められなかった(P>0.05)。トランスフェクション群,対照群とブランク群の間には,グルコースとアルカリホスファターゼの濃度に有意差はなかった(P>0.05)が,CaABC2遺伝子は総コレステロール,還元型グルタチオン,グルコース,およびアルカリ性ホスファターゼを輸送し,総コレステロールを輸送するのに最も効果的であった。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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遺伝子操作 
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