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J-GLOBAL ID:201802280579203125   整理番号:18A0679892

GFPを安定的に発現する骨髄異形成症候群による白血病細胞株の樹立【JST・京大機械翻訳】

Establishment of A Myelodysplastic Syndrome Transformed to Leukemia Cell Line Stably Expressing Green Fluorescent Protein
著者 (8件):
資料名:
巻: 25  号:ページ: 1487-1492  発行年: 2017年 
JST資料番号: C3086A  ISSN: 1009-2137  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的;緑色蛍光タンパク質(green fluorescent protein、GFP)を安定的に発現する骨髄異形成症候群の白血病細胞株を樹立し、その生物学的特性及びその応用を評価する。方法;ヒト骨髄異形成症候群を白血病細胞株SKM-1を母系細胞に転化し、GFP遺伝子を持つレンチウイルスによりトランスフェクションし、有限希釈法によりGFP陽性の単細胞クローンを獲得し、さらに培養後の細胞を皮下注射することでマウスの体内でスクリーニングした。腫瘍形成後に腫瘍塊を分離し、続いて培養を行い、SKM-1/GFP細胞株を獲得した。蛍光顕微鏡により細胞形態を観察し、フローサイトメトリーを用いて細胞の蛍光発現レベルを測定し、CCK-8法により細胞増殖特性を測定し、培養後のSKM-1/GFP細胞を免疫不全マウスの皮下に接種した。腫瘍形成後、腫瘍塊及び各臓器組織の浸潤状況を観察した。結果;SKM-1/GFP細胞の形態と成長特性はSKM-1母系細胞とは差がなく、フローサイトメトリーによるGFPの発現率は100%であり、体外CCK-8法による生長曲線の測定により、SKM-1/GFP細胞と母系SKM-1細胞には明らかな差異がないことが示された。SKD-1/GFP細胞をNOD/SCIDマウスの皮下に接種し、14dの時に腫瘍塊が形成され、30dの時、蛍光顕微鏡下で担癌マウスを観察し、腫瘍塊の自然蛍光が見られた。蛍光顕微鏡下で腫れ物の凍結切片を観察し、比較的均一なGFP陽性細胞が見られた。凍結切片により、マウスの心臓、肝臓、胃、腎臓に腫瘍細胞の浸潤があることが示された。結論;GFPを安定的に発現する骨髄異形成症候群細胞株SKM-1/GFPを樹立し、この細胞株は腫瘍細胞を高感度に追跡でき、微小残存疾患の研究に応用でき、骨髄異形成症候群の急性白血病の研究に新たな実験プラットフォームを提供した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
著者キーワード (4件):
分類 (2件):
分類
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血液の診断  ,  血液の腫よう 
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