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J-GLOBAL ID:201802282626248889   整理番号:18A2101118

工業用酵母Komagataella phaffiiによる異種蛋白質の連続生産のためのプロセス開発【JST・京大機械翻訳】

Process development for the continuous production of heterologous proteins by the industrial yeast, Komagataella phaffii
著者 (6件):
資料名:
巻: 115  号: 12  ページ: 2962-2973  発行年: 2018年 
JST資料番号: D0019A  ISSN: 0006-3592  CODEN: BIBIAU  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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工業的バイオテクノロジーにおける現在の傾向は,バッチまたは流加発酵から連続操作に移行することである。この転移の成功は,遺伝的に安定な生産株の開発,強い構成的プロモーターの使用,および細胞増殖と生成物形成の間の適切なバランスを可能にする新しい培地製剤の開発を必要とするであろう。異なる定常状態条件でKomagataella phaffiiにおいて高発現を示す遺伝子を同定し,これら遺伝子のプロモーター(Chr1-4_0586とFragB_0052)の有用性を,広く用いられているグリセルアルデヒド-3-ホスファートデヒドロゲナーゼプロモーターと比較して,2つの異なるr蛋白質,ヒトリゾチーム(HuLy)と抗idiオタイプ抗体フラグメント,Fab-3H6の発現を最適化した。著者らの結果は,プロモーター強度が培養条件に高度に依存していることを示し,従って,関心のある蛋白質の発現のための最良の実行クローンと理想的プロモーターの両方を決定するための条件の範囲で構築物を試験する必要がある。連続生産の重要な利点は,菌株と栽培培地の設計におけるゲノム規模の代謝モデルの使用を容易にすることである。in silicoフラックス分布は,どちらかの蛋白質の生産が芳香族アミノ酸生合成を通してフラックスを増加させることを示した。チロシン添加は両蛋白質の生産性を増加させたが,トリプトファン添加は有意な変化を引き起こさず,フェニルアラニン添加はHuLyの発現を増加させたが,Fab-3H6の発現を減少させた。これらの結果は,ゲノムスケールの代謝モデルが特定のr-蛋白質の合成によって課される代謝負荷を評価するために使用できることを示した。そして,この情報は生産を増加させるために培養培地を調整するために使用できる。Copyright 2018 Wiley Publishing Japan K.K. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (4件):
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細胞生理一般  ,  遺伝子発現  ,  遺伝子操作  ,  動物組織・細胞による物質生産 
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