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J-GLOBAL ID:201802282967474212   整理番号:18A1569381

あなたの洗剤を知る:負の染色電子顕微鏡における洗剤背景に関する事例研究【JST・京大機械翻訳】

Know your detergents: A case study on detergent background in negative stain electron microscopy
著者 (4件):
資料名:
巻: 203  号:ページ: 242-246  発行年: 2018年 
JST資料番号: W0838A  ISSN: 1047-8477  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 短報  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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精製された高分子錯体の電子低温顕微鏡(cryo-EM)は,現在,近原子分解能(Kuehlbrandt,2014)で3D構造を提供している。低温EMは不均一試料に耐えることができるが,高分解能の努力は非常に最適化された試料を必要とするしたがって,最終データセットが得られる前に,有意な事前スクリーニングと評価が不可欠である。低温EMは比較的遅く,高価な高末端電子顕微鏡へのアクセスを必要とするが,室温負染色EMは高速,安価で,即時フィードバックを提供する。これにより,プロジェクトの初期段階におけるサンプル品質管理のための一般的なアプローチとなった。陰性染色における最適化は,低温EMだけでなくX線結晶学に対しても重要であり,例えばGPCR複合体(Kangら,2015;Rasmussenら,2012)に関する研究によって強調される。しかし,慎重に行われず,正しく解釈されない場合,負の染色はアーチファクトを起こしやすい。小さな膜蛋白質のEMデータの解釈においてしばしば見過ごされる典型的な問題は,界面活性剤埋め込み蛋白質試料と容易に混同できるので,空の界面活性剤ミセルにより引き起こされる背景である。このユビキタス問題に対抗するために,一般的に使用される洗剤に関する事例研究を提示した。ほとんどの界面活性剤は,公称臨界ミセル濃度(CMC)以下でも,負の染色EMにおいて有意なバックグラウンドを生成することを示した。そのようなアーチファクトの認識は,サンプルの質と均一性の誤解をもたらすことができる。本研究は,プロジェクトの初期段階における画像を評価するためのテンプレートとして役立つことを希望する。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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生体の顕微鏡観察法 
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