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J-GLOBAL ID：201802283125871376   整理番号：18A0646464

【結語】:in vitroおよびin vitroにおいて,シタビラトリンBのin vitroでの組換え型調製と生物活性分析【JST・京大機械翻訳】

In vitro recombinant expression and bioactivity analysis of orexin B from Cynoglossus semilaevis

著者 (7件)： Xu Yongjiang (中国水産科学研究院黄海水産研究所,山東青島266071;青島海洋科学与技術国家実験室海洋漁業科学与食物産出過程功能実験室,山東青島266237) ,  Li Bin (中国水産科学研究院黄海水産研究所,山東青島266071;青島海洋科学与技術国家実験室海洋漁業科学与食物産出過程功能実験室,山東青島266237) ,  Liu Xuezhou (中国水産科学研究院黄海水産研究所,山東青島266071;青島海洋科学与技術国家実験室海洋漁業科学与食物産出過程功能実験室,山東青島266237) ,  Zhang Kai (青島貝宝海洋科技有限公司,山東青島,266400) ,  Shi Bao (中国水産科学研究院黄海水産研究所,山東青島266071;青島海洋科学与技術国家実験室海洋漁業科学与食物産出過程功能実験室,山東青島266237) ,  Wang Bin (中国水産科学研究院黄海水産研究所,山東青島266071;青島海洋科学与技術国家実験室海洋漁業科学与食物産出過程功能実験室,山東青島266237) ,  Song Xuesong (中国水産科学研究院黄海水産研究所,山東青島266071;青島海洋科学与技術国家実験室海洋漁業科学与食物産出過程功能実験室,山東青島266237)
資料名： Shuichan Xuebao  (Shuichan Xuebao)
巻： 41  号： 9  ページ： 1374-1382  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2171A  ISSN： 1000-0615  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究の目的は,オタネニンジンの摂食に及ぼすオレキシンの影響を理解するために,原核生物発現ベクターpET-32aを用いて,組換え型の半定量的に発現する組換えプラスミドを構築することに成功した。大腸菌BL21に転換した後、IPTG誘導により、N末端に6つのヒスチジン分子タグを含むorexinB組換えタンパク質を得た。組換えタンパク質のサイズは21.14kuであり,37°Cでの1.0mmol/LのIPTGによる6時間の誘導後には,全蛋白質の43.5%を占めた。 exexinBの発現が最も高かった。ウェスタンブロット法により,主に上澄液中に分泌されることが示された。得られた組換蛋白質は6×His抗体によって特異的に認識され,Ni2+-NTAアフィニティークロマトグラフィーによって精製された高純度を有する組換え蛋白質を得ることができた。in vitro培養実験により、orexinB組み換えタンパク質は視床下部神経ペプチドY(NPYペプチド)の分泌とNPY、orexin mRNAの発現を促進でき、獲得した組換えタンパク質はホルモンと遺伝子レベルで視床下部の摂食関連神経ペプチドの発現を制御することが分かった。それは明らかな生物活性を示した。本研究の結果は,シトリニンBの蛋白質の調製と高効率の生物学的製剤の開発のための技術的サポートを提供することができた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 組換タンパク質 ,  原核生物 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  遺伝子 ,  *生物活性 ,  抗体 ,  大腸菌 ,  mRNA ,  視床下部 ,  ニューロペプチドY ,  ウェスタンブロット法 ,  タンパク質 ,  神経ペプチド
準シソーラス用語： 発現ベクター ,  *組換体 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Cynoglossus semilaevi ,  orexin B ,  prokaryotic expression ,  bioactivity analysis

分類 (3件)： 蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (4件)： 組換え型 ,  調製 ,  生物活性 ,  分析