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J-GLOBAL ID：201802285984956149   整理番号：18A0644773

ヤギのPMEL遺伝子プロモーター活性と転写調節エレメントの分析【JST・京大機械翻訳】

Analysis of the Promoter Activity and Transcriptional Regulatory Elements of Goat PMEL Gene

著者 (4件)： Li Lisha (河北科技師范学院,秦皇島066004;河北農業大学,保定071000) ,  Peng Yongdong (河北科技師范学院,秦皇島,066004) ,  Zheng Xiaoning (河北科技師范学院,秦皇島066004;河北農業大学,保定071000) ,  Li Xianglong (河北科技師范学院,秦皇島,066004)
資料名： Xumu Shouyi Xuebao  (Xumu Shouyi Xuebao)
巻： 48  号： 5  ページ： 826-835  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2231A  ISSN： 0366-6964  CODEN： CMHPAI  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究の目的はヤギの毛色遺伝子PMELのプロモーター活性領域と転写因子をスクリーニングし、この遺伝子の発現調節メカニズムを探究するために理論的根拠を提供し、そして、ヤギの育種と改良に構想を提供することである。ヤギのゲノムDNAをテンプレートとし、PCRによりPMEL遺伝子の異なる長さのプロモーター欠失断片を増幅し、pGL3-basicベクターにクローンし、組換えプラスミドを293TとA375細胞にトランスフェクションし、二重ルシフェラーゼアッセイにより相対ルシフェラーゼ活性値を測定した。PMEL遺伝子プロモーター領域の転写因子結合部位を生物情報学的方法によって予測し,次に,pGL3-327プラスミドによって予測された転写因子結合部位をオーバーラップPCRによって突然変異させて,突然変異ベクターを構築した。二重ルシフェラーゼアッセイ系により活性を検証した。結果により、本研究は7つの異なる長さのプロモーター断片を構築することに成功し、そのうち6つのフラグメントは明らかなプロモーター活性を持つことを示した。二重ルシフェラーゼアッセイにより,ヤギのPMEL遺伝子が-251/+76領域にあることを示した。異なる長さのプロモーター断片の活性の比較により、-251/-62領域の欠失はプロモーター活性を最も高くから消失させ、この領域はヤギPMEL遺伝子の転写制御に重要な影響があり、生物情報学的分析により、この領域に5つの転写因子結合部位が存在することが分かった。5つの突然変異体を,点突然変異によって構築し,そして,5つの突然変異体の活性は,二重ルシフェラーゼアッセイによって,著しく減少した。これらの5つの転写因子がヤギPMEL遺伝子転写の正の調節要素であることを示唆した。本研究はヤギPMEL遺伝子プロモーターのコア領域が-251/+76であることを確認した。NF-1(-206/-197),Sp1(-186/-174),Sp1(-151/-139),CREB-(91/-82)およびSp1(-82/-71)結合部位はヤギPMEL遺伝子転写の正の調節要素であった。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 結合部位 ,  転写因子 ,  点突然変異 ,  ベクター ,  *プロモーター領域 ,  突然変異 ,  プラスミド ,  *遺伝子 ,  トランスフェクション
準シソーラス用語： *転写調節 ,  バイオインフォマティクス ,  転写因子結合部位 ,  ルシフェラーゼアッセイ ,  *転写調節エレメント ,  *プロモーター活性 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： PMEL gene ,  promoter ,  transient expression ,  point mutation ,  transcriptional regulatory elements

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (5件)： ヤギ ,  遺伝子プロモーター ,  活性 ,  転写調節エレメント ,  分析