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J-GLOBAL ID：201802286795621394   整理番号：18A0125574

質量分析に結合した固相抽出及び液体クロマトグラフィーによるウマ血しょう中のα-コブラトキシンの検出と確認【Powered by NICT】

Detection and confirmation of α-cobratoxin in equine plasma by solid-phase extraction and liquid chromatography coupled to mass spectrometry

著者 (8件)： Guan Fuyu (Department of Clinical Studies, School of Veterinary Medicine, University of Pennsylvania, New Bolton Center Campus, 382 West Street Road, Kennett Square, PA, 19348, USA) ,  Guan Fuyu (Pennsylvania Equine Toxicology and Research Laboratory, 220 East Rosedale Avenue, West Chester, PA, 19382, USA) ,  You Youwen (Department of Clinical Studies, School of Veterinary Medicine, University of Pennsylvania, New Bolton Center Campus, 382 West Street Road, Kennett Square, PA, 19348, USA) ,  You Youwen (Pennsylvania Equine Toxicology and Research Laboratory, 220 East Rosedale Avenue, West Chester, PA, 19382, USA) ,  Li Xiaoqing (Department of Clinical Studies, School of Veterinary Medicine, University of Pennsylvania, New Bolton Center Campus, 382 West Street Road, Kennett Square, PA, 19348, USA) ,  Li Xiaoqing (Pennsylvania Equine Toxicology and Research Laboratory, 220 East Rosedale Avenue, West Chester, PA, 19382, USA) ,  Robinson Mary A. (Department of Clinical Studies, School of Veterinary Medicine, University of Pennsylvania, New Bolton Center Campus, 382 West Street Road, Kennett Square, PA, 19348, USA) ,  Robinson Mary A. (Pennsylvania Equine Toxicology and Research Laboratory, 220 East Rosedale Avenue, West Chester, PA, 19382, USA)
資料名： Journal of Chromatography A  (Journal of Chromatography A)
巻： 1533  ページ： 38-48  発行年： 2018年 
JST資料番号： C0278B  ISSN： 0021-9673  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： α-コブラトキシン(CTX)は強い鎮痛効果を持つ大きなペプチド(71アミノ酸)であり,競馬のようなスポーツで誤用されたかもしれない。このような誤用を防止するために,ウマ試料中の毒素の検出と確認に必要である高感度な方法。CTXを最適化混合モード固相抽出(SPE)法を用いたウマの血漿から抽出した。抽出CTXはジチオトレイトールで還元し,ヨードアセトアミドによるアルキル化し,56°Cで30分間のトリプシンで消化した。消化物をタンデム質量分析(LC MS/MS)に結合した液体クロマトグラフィーで分析し,トリプシンペプチドT2(~3CFITPDITSK~12)およびT4(~24TWCDAFCSIR~33)はCTXの検出と確認のためのモニターした。検出限界(LOD)は,血漿中のCTX,確認限界(LOC)0.2ng/mLで0.05ng/mLであった。20標準アミノ酸からなる小ペプチドとは異なり,CTXが室温で少なくとも24hのウマ血しょうで安定であった。開発した分析法は,実血漿試料の分析に成功裏に適用された;CTXは研究ウマへのCTX(2.0mg)の皮下投与36時間を通してプラズマ採取した15分で検出され,24時間まで30分を確認した。さらに,「信頼性のある標的化SEQUEST検索」と名付けられるアプローチがCTXの確認のための生成物イオンスペクトルレベルでT2の特異性を評価するために提案されている。T2であるCTXに特異的なこのアプローチとBLAST検索で評価した。さらに,T2とT4,背景ノイズレベルと信号対雑音比(S/N)のエレクトロスプレイ(ESI)応答に及ぼす移動相添加剤としてジメチルスルホキシド(DMSO)の影響を調べた;DMSOは2以下の因子によるT2とT4の信号強度を増加させた。DMSOは背景ノイズレベルを上昇させ,ペプチドのS/Nを改善し,著者らの知る限りではなかったという最初の報告である。開発した分析法は,グレーハウンド犬またはヒトも人間のような他の種からの血漿中のCTXの分析に適用できる可能性がある。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： トリプシン ,  SN比 ,  *固相抽出 ,  最適化 ,  添加剤 ,  ペプチド ,  *液体クロマトグラフィー ,  高感度 ,  検出限界 ,  タンデム質量分析 ,  消化 ,  *血漿 ,  ヒト ,  アルキル化
準シソーラス用語： 背景雑音 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： アルファコブラ毒素 ,  ドーピング ,  混合モード固相抽出 ,  LC-MS ,  プラズマ ,  ジメチルスルホキシド(DMSO)

分類 (1件)： 有機化合物の各種分析  (CC08034J)

タイトルに関連する用語 (6件)： 質量分析 ,  固相抽出 ,  液体クロマトグラフィー ,  ウマ ,  血しょう ,  ラトキシン