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J-GLOBAL ID：201802287662202202   整理番号：18A0274121

スケーラブルリジルヒドロキシラーゼ2発現系とルシフェラーゼに基づく酵素活性アッセイ【Powered by NICT】

A scalable lysyl hydroxylase 2 expression system and luciferase-based enzymatic activity assay

著者 (10件)： Guo Hou-Fu (Department of Thoracic/Head and Neck Medical Oncology, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX, United States) ,  Cho Eun Jeong (Division of Medicinal Chemistry, Targeted Therapeutic Drug Discovery and Development Program, College of Pharmacy, The University of Texas at Austin, Austin, TX, United States) ,  Devkota Ashwini K. (Division of Medicinal Chemistry, Targeted Therapeutic Drug Discovery and Development Program, College of Pharmacy, The University of Texas at Austin, Austin, TX, United States) ,  Chen Yulong (Department of Thoracic/Head and Neck Medical Oncology, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX, United States) ,  Russell William (Departments of Biochemistry and Molecular Biology, University of Texas Medical Branch, Galveston, TX, United States) ,  Phillips George N. (Department of Biosciences and Chemistry, Rice University, Houston, TX, United States) ,  Yamauchi Mitsuo (Oral and Craniofacial Health Sciences, School of Dentistry, University of North Carolina at Chapel Hill, Chapel Hill, NC, United States) ,  Dalby Kevin N. (Division of Medicinal Chemistry, Targeted Therapeutic Drug Discovery and Development Program, College of Pharmacy, The University of Texas at Austin, Austin, TX, United States) ,  Dalby Kevin N. (Division of Chemical Biology & Medicinal Chemistry, College of Pharmacy, The University of Texas at Austin, Austin, TX, United States) ,  Kurie Jonathan M. (Department of Thoracic/Head and Neck Medical Oncology, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX, United States)
資料名： Archives of Biochemistry and Biophysics  (Archives of Biochemistry and Biophysics)
巻： 618  ページ： 45-51  発行年： 2017年 
JST資料番号： B0023A  ISSN： 0003-9861  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ヒドロキシリジンアルデヒドコラーゲン架橋(HLCCs)は線維組織とある種の癌で蓄積し,これらの疾患の進行を推進すると考えられている。HLCC形成はコラーゲンに及ぼすtelopeptidylリジン残基をヒドロキシル化することリジルヒドロキシラーゼ2(L H2),Fe(II)とα-ケトグルタル酸(αKG)依存性オキシゲナーゼにより開始される。これらの疾患の治療のためのL H2きっ抗薬の開発は,小分子ライブラリーのハイスループットスクリーニングに適した組換LH2蛋白質と非放射性L H2酵素活性アッセイの信頼できる供給源を必要とするであろう。しかし,大腸菌または昆虫に基づく発現系を用いて生成したL H2蛋白質は不溶性又は酵素的に不安定であり,現在利用可能なL H2酵素活性アッセイは,コハク酸への転換に伴う~14C標識αKGから放出された放射性CO_2を測定した。これらの欠点に対処するために,著者らはチャイニーズハムスター卵巣細胞由来馴化培地試料からヒトLH2蛋白質とコハク酸にαKGのLH2依存変換を定量化するルシフェラーゼに基づくアッセイを精製する大規模プロセスを開発した。これらの方法論は他のFe(II)とαKG依存オキシゲナーゼ系にも適用可能である。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： 単供与体オキシゲナーゼ ,  CHO細胞 ,  ヒドロキシ化 ,  コラーゲン ,  タンパク質 ,  *ルシフェラーゼ ,  鉄 ,  *酵素活性度 ,  *酵素 ,  大腸菌 ,  ヒト ,  脂肪族カルボン酸 ,  ジカルボン酸
準シソーラス用語： 順化培地 ,  アンタゴニスト ,  リジン残基 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： リジルヒドロキシラーゼ2 ,  コラーゲン ,  ハイスループットアッセイ ,  コハク酸検出 ,  チャイニーズハムスター卵巣細胞 ,  オキシゲナーゼ

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

物質索引 (1件)： コハク酸

タイトルに関連する用語 (4件)： 発現 ,  ルシフェラーゼ ,  酵素活性 ,  アッセイ