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J-GLOBAL ID:201802290482830441   整理番号:18A0895801

HuR遺伝子クローニングとその肝癌細胞における発現【JST・京大機械翻訳】

HuR gene clone and construction of its eukaryotic expressional vector
著者 (5件):
資料名:
巻: 26  号:ページ: 1-4  発行年: 2018年 
JST資料番号: C3555A  ISSN: 1672-4992  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的:ヒト抗原R遺伝子(HuR)のcDNAをクローンし、組み換え真核細胞発現ベクターpEGFP-HuRを構築し、肝癌細胞株に安定的にトランスフェクションした。【方法】ヒトHuR遺伝子のcDNA配列を,RT-PCRによって増幅して,XhoIとEcoRIの二重酵素消化とDNA配列によって同定した後,組換え型真核細胞発現ベクターを,リポフェクタミン(G418)によって形質移入し,そして,HuR遺伝子の過剰発現を,新規マイシン(G418)によってスクリーニングし,そして,組換えプラスミドを,ウエスタンブロット法によって,同定した。.HuR遺伝子の遺伝子発現を,invitroで,invitroで,HepG2細胞の中へ,そして,ハイブリドーマ細胞(G418)によって,それぞれ,トランスフェクションした,そして,HepG2細胞中のHuR遺伝子の過剰発現を,invitroでのPCRによって,確認した。。.HuR遺伝子のクローンは,リポフェクタミン(G418)によって,HepG2細胞の中へ,形質移入された,そして,そして,組換えプラスミドは,リポフェクタミン(G418)によって,それぞれ,トランスフェクションした,そして,HuR遺伝子のmRNAは,リポフェクタミン(G418)によってスクリーニングされた。結果:XhoIとEcoRIの二重酵素消化とPCRの結果は真核細胞発現ベクターpEGFP-HuRの構築に成功し、Westernblot結果により、安定トランスフェクション組み換え真核細胞発現ベクターの肝癌細胞中のHuR遺伝子発現レベルのアップレギュレーションを示した。結論:真核生物発現ベクターpEGFP-HuRの構築に成功し、その安定トランスフェクション後のHuR発現のアップレギュレーションされた肝癌細胞株を選別し、さらにHuR遺伝子の生物学的機能の研究の前期の仕事とする。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子発現 
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