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J-GLOBAL ID：201802291512182539   整理番号：18A0869514

オレキシン2型受容体点変異体発現ベクターの構築【JST・京大機械翻訳】

Construction of OX2R mutant expression vector

著者 (3件)： Liu Minghui (曲阜師范大学,曲阜,273165) ,  Wang Chunmei (済寧医学院神経生物学研究所,済寧,272067) ,  Chen Jing (済寧医学院神経生物学研究所,済寧,272067)
資料名： Jining Yixueyuan Xuebao  (Jining Yixueyuan Xuebao)
巻： 40  号： 6  ページ： 389-392  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3496A  ISSN： 1000-9760  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】黄色の蛍光蛋白質変異体Venusラベルを持つオレキシン2受容体(OX2R)の真核生物発現ベクターを構築する。OX2R媒介シグナル伝達経路における突然変異部位の役割を明らかにする。方法:OX2R遺伝子の配列に基づいて,点突然変異と制限酵素部位(HindIIIとBamHI)の特異的プライマーを設計し,次に,ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)技術を用い,HumanOX2Rをテンプレートとし,OX2Rの変異体を構築した。HindIIIとBamHIを用いて、産物とプラスミドpVenus-N1に対して二重酵素消化を行い、その後、回収、連結、転化を行い、組換えの変異体プラスミドを得た。組換えプラスミドを制限酵素消化と配列決定によって同定した。最後に、突然変異プラスミドをHEK293T細胞にトランスフェクションし、超解像顕微鏡を用いて、突然変異プラスミドの発現と定位を観察した。【結果】PCRにより予期された標的遺伝子断片を増幅して,OX2R突然変異ベクターを制限酵素消化と塩基配列決定によって首尾よく構築した。超解像顕微鏡により、突然変異プラスミドと野生プラスミドは共にHEK293T細胞膜に発現できることが分かった。結論:OX2R点突然変異の発現ベクターの構築に成功し、OX2Rの重要部位の更なる研究及びOX2R新薬の開発に基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ヌクレオチド配列 ,  DNA制限酵素 ,  点突然変異 ,  真核生物 ,  消化 ,  PCR法 ,  トランスフェクション ,  プラスミド ,  突然変異 ,  *受容体 ,  *ベクター ,  酵素的分解
準シソーラス用語： HEK293T細胞 ,  蛍光蛋白質 ,  *発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (5件)： オレキシン ,  受容体 ,  変異体 ,  発現ベクター ,  構築