抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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目的;異なる濃度のイチョウ葉抽出物(GBE)による破骨細胞分化と骨吸収に対する作用を検討し、その作用機序を解明する。方法;in vitroでRAW264.7細胞を培養し,核因子κB受容体活性化因子リガンド(RANKL)と異なる濃度のGBEを用いて細胞を処理した。対照群(0μg L-1 RANKL)、RANKL群(100μg L-1 RANKL)とRANKL+75 mg・L-1 GBEとRANKL+150 mg・L-1 GBE群に分けた。破骨細胞の形態および数を,酒石酸耐性染色(TRAP)によって観察し,破骨細胞の骨吸収能に及ぼすGBEの影響を,骨吸収の陥凹面積によって評価し,そして,細胞アポトーシス率および細胞周期を,フローサイトメトリーによって検出し,そして,骨芽細胞のアポトーシス率を,フローサイトメトリーによって測定した。RAW264.7細胞における破骨細胞関連遺伝子の活性化T細胞核因子c1(NFATc1),樹状細胞特異的膜貫通蛋白質(DC-STAMP),組織プロテイナーゼK(Cathepsin K),マトリックスメタロプロテアーゼ9(MMP-9),Bリンパ球腫2(Bcl-2),Bcl-2関連蛋白質(Bax),P27,およびサイクリンD-1の発現レベルを検出した。結果;対照群と比較して,RANKL群における破骨細胞の数は,有意に増加した(P<0.05)。RANKL群と比較して,RANKL+75mg・L(-1)GBE群およびRANKL+150mg・L(-1)GBE群における破骨細胞数は,有意に減少した(P<0.05)。ブランク対照群と比較して,RANKL群における骨吸収の陥凹領域は,有意に増加した(P<0.05)。RANKL群と比較して,RANKL+75mg・L(-1)GBE群とRANKL+150mg・L(-1)GBE群における骨吸収は,有意に減少した(P<0.05)。ブランク対照群と比較して,75および150mg L-1GBE群におけるRAW264.7細胞のアポトーシス率は増加した(P<0.05)が,RAW264.7細胞におけるBcl-2遺伝子発現は有意に減少した(P<0.05)。Bax遺伝子の発現レベルは明らかに上昇した(P<0.05)。RANKL群と比較して,RANKL+75mg・L(-1)GBE群およびRANKL+150mg・L(-1)GBE群のRAW264.7細胞のG0-G1期は,有意に短縮された(P<0.05)。RAW264.7細胞におけるP27遺伝子の発現レベルは明らかに低下し(P<0.05),サイクリンD-1遺伝子の発現レベルは明らかに上昇した(P<0.05)。【結果】対照群と比較して,RANKL群のRAW264.7細胞における破骨細胞関連遺伝子NFATc1,DC-STAMP,Cathepsin KおよびMMP-9の発現は,有意に増加した(P<0.05)。RANKL群と比較した。RANKL+75mg・L-1GBEとRANKL+150mg・L-1GBE群のRAW264.7細胞における破骨細胞関連遺伝子NFATc1、DC-STAMP、Cathepsin KとMMP-9の発現レベルは明らかに低下した(P<0.05)。結論;GBEは破骨細胞の分化と骨吸収能力を抑制することができ、そのメカニズムはRAW264.7細胞のアポトーシスを促進し、RANKLが誘導したRAW264.7細胞のG0-G1期を短縮することに関連する可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】