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J-GLOBAL ID:201902210331452291   整理番号:19A1945008

遺伝マーカーを保有するブタパルボウイルスの感染クローンの構築と特性化【JST・京大機械翻訳】

Construction and characterization of the infectious clone of porcine parvovirus carrying genetic marker
著者 (10件):
資料名:
巻: 235  ページ: 143-150  発行年: 2019年 
JST資料番号: A1255A  ISSN: 0378-1135  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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ブタパルボウイルス(PPV)は,妊娠ブタの生殖不全をもたらす主要病原体の1つである。しかしながら,病因機構の研究は,効率的な遺伝的操作法の欠如により,回避されている。感染性クローンはPPVの遺伝的機構をさらに研究するための強力なツールである。本研究において,PPVの遺伝子フラグメント(157-4812)を鋳型としてPPV 中国分離株により増幅し,3′末端にU-構造を形成する5′末端及び(4788-5074)のY構造を形成するPPV DNAフラグメント(1-182)を合成した。そして,上記の3つのフラグメントをプラスミドpKQLLに挿入し,In融合クローニング技術によってPPV完全長組換えプラスミドを集合させた。組換えプラスミドの成功裏の配列決定の後,EcoR I制限部位を非センス突然変異(A3058T)によって遺伝子マーカーとしてもたらし,プラスミドY-PPVを生産し,ウイルスのレスキューのためにPK-15細胞にトランスフェクションした。レスキューされたウイルス粒子は透過型電子顕微鏡下で観察され,配列解析はY-PPVが遺伝的マーカーを安定に運ぶことができることを示した。Y-PPVは細胞及び動物実験により野生型親PPV株と同様の複製能及び病原性を有することが分かった。これらの結果は,Y-PPVが野生型親PPV株と類似の生物学的特性を維持することを確認した。感染性クローンは,PPVの個々の遺伝子および遺伝子欠失または生ベクターワクチンにおける応用を研究するための価値あるツールとなり得る。Copyright 2019 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
分類
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ウイルスによる動物の伝染病  ,  ウイルス感染の生理と病原性 

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