抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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プールされたヒト顆粒膜細胞(GC)におけるミトコンドリア機能が高齢患者と若年患者の間で異なるかどうかを決定する。病院ベースの補助生殖プログラムと公共大学における前向き研究。本研究は,2018年と2019年の間のin vitro受精を受けている14人の女性からのプールGCにおけるミトコンドリアによる代謝基質代謝の速度を評価した。壁および卵丘GCの両方を採取し,プールし,各患者の血液細胞から精製した。透過性細胞を,96ウェルMitoPlate S-1プレート(Biolog)を用いてミトコンドリア活性のために3倍体で分析した。プレートは31の細胞質とミトコンドリア代謝基質を含んだ。基質の代謝は,速度論的プレートリーダー上で50サイクル,2.5分ごとに読み込まれた590nmの波長での末端電子受容体テトラゾリウム酸化還元染料の比色変化によって評価された。全ての基質の速度に基づいて代謝スコアを作成し,各試料のmtDNA含量に対して正規化した。スコアは,年齢,体重指数,成熟卵母細胞の割合,受精率,3日目の胚発生,胚盤胞発生,ミトコンドリア含有量,および選択された遺伝子のmRNAレベルを含む患者の人口統計学に関連した。各患者のプールGCからRNAとDNAを分離した。定量的PCRを実施した。評価されたmRNAは,アンフィレグリン(AREG),アロマターゼ(CYP19A1),ヒドロキシ-デルタ-5-ステロイドデヒドロゲナーゼ,3β-およびステロイド・デルタ-イソメラーゼ1(HSD3B1),成長蛋白質1(ING1)の阻害剤,黄体形成ホルモン/choriオドトロピン受容体(LHCGR),papシン-1(PAPPA),TATA-ボックス結合蛋白質(TBP)を含んだ。ミトコンドリアにコードされたATPシンターゼ膜サブユニット8(MT-ATP8)とアクチンβ(ACTB)をDNAから定量した。線形回帰分析は,mtDNA含量が患者年齢およびGC CYP19A1 mRNAレベルと逆相関することを示した(p<0.05)。サンプルを,<35歳と≧35歳の2つの年齢群に分割した。GC PAPPA mRNAレベルは,高齢群で有意に増加した(p=0.028)。いくつかの基質の代謝の平均速度は,老齢群で有意に減少した。D-グルコン酸-6-りん酸;D,L-α-グリセロールリン酸;L-(+)-乳酸;L-グルタミン;アラニン/グリシン;α-ケトグルタル酸;α-ケト酪酸;そして,パルミトイル-D,L-リンゴ酸によるL-カルニチン(p<0.05)。他のパラメータは有意差を示さなかった。ある種の基質に対するミトコンドリア代謝機能の平均速度は,若い患者と比較した場合,高齢患者で低下した。さらに,プールされたGC PAPPAとCYP19A1mRNAレベルは,若い患者と高齢患者の間で変化した。南カロライナ大学からのASPIRE-Igrによって提供された開示は何もない。Copyright 2019 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】