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J-GLOBAL ID:201902221466052126   整理番号:19A2691325

抗ヒトCD61抗体で固定化したアフィニティーモノリスカラムによる血漿からの血小板由来細胞外小胞の高特異的集団の迅速分離【JST・京大機械翻訳】

Fast isolation of highly specific population of platelet-derived extracellular vesicles from blood plasma by affinity monolithic column, immobilized with anti-human CD61 antibody
著者 (5件):
資料名:
巻: 1091  ページ: 160-168  発行年: 2019年 
JST資料番号: A0394A  ISSN: 0003-2670  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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抗ヒトCD61抗体で固定化されたメタクリル酸ベースの対流相互作用媒体(CIM)ディスクモノリスカラムを含む新しい迅速で選択的な免疫親和性クロマトグラフィー法を,血漿からCD61を含む血小板由来細胞外小胞(EVs)の分離のために開発した。分離したEVsを検出し,多角度光散乱(MALS)と動的光散乱(DLS)検出による非対称流れ場流分画(AsFlFFF)により特性化し,さらにナノ粒子追跡分析(NTA)と透過型電子顕微鏡(TEM)により確認した。抗CD61 CIMディスクモノリスカラムからの血小板由来EV分離株の平均サイズは,NTA結果に基づく174nm(SD60nm)であった。これらの結果は,透過型電子顕微鏡と共にEV特異的マーカーCD9およびTSG101に対する分離株をウェスタンブロット法により確認した血小板由来EVsの成功裏の分離を示した。MALSとDLSデータのさらなる解明は,分離画分のサイズ分布の詳細な情報を提供し,流体力学的半径に基づいて,30から130nmの範囲の小血小板由来EVsの成功裏の分離を確認した。分離手順は19分だけで,時間は流速を増加させることによってさらに減少させることができた。AsFlFFFに続く同じ免疫親和性クロマトグラフィー法は,60分以内の血漿からの血小板由来EVsの分離と特性化も可能にした。複数の用途のために抗CD61ディスクを再生することが可能であるので,本研究で開発した方法論は,従来のEV分離手順への実行可能な置換と追加を提供する。Copyright 2019 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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有機化合物の各種分析  ,  クロマトグラフィー,電気泳動 

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