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J-GLOBAL ID:201902223528803285   整理番号:19A1809695

係留脂質二重層に安定に組み込まれたPseudomonas aeruginosa由来の無細胞発現OprFポリンの機能的特性化【JST・京大機械翻訳】

Functional Characterization of Cell-Free Expressed OprF Porin from Pseudomonas aeruginosa Stably Incorporated in Tethered Lipid Bilayers
著者 (8件):
資料名:
巻: 33  号: 38  ページ: 9988-9996  発行年: 2017年 
JST資料番号: A0231B  ISSN: 0743-7463  CODEN: LANGD5  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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OprFは緑膿菌の病原性において中心的役割を有し,抗生物質に対する細菌の自然耐性を克服できるワクチンまたは抗生物質補因子のいずれかに対する推定標的を提供する。ここでは,結合脂質二分子層に組み込まれた高度に純粋で機能的なOprFポリンの生産を最適化する手順について述べた。これは,OprFと中性子反射測定法および電気インピーダンス分光法の構造的側面と機能を調べる能力を提供する安定な生体模倣システムである。最適化された無細胞法を用いて生産された組換えOprFは,プロテオリポソームにおいて85から91%の範囲の純度で0.5から1.0mg/mLの間の量をもたらした。組換えOprFはIFN-γを結合でき,プロテオリポソームで正しく折畳まれている。OprF蛋白質は細孔を形成するので,生体模倣システムはインピーダンス分光法を用いてOprFコンダクタンスの測定を可能にした。中性子反射測定は,OprF蛋白質が脂質二分子層に取り込まれるが,脂質二分子層の上と下の両領域に蛋白質の部分があることを示した。これらの構造的側面は,8つの鎖状β-バレルとペリプラズムに位置する球状C末端ドメインから成る膜貫通N末端ドメインの現在想定される構造と一致する。現在,OprFに利用可能な結晶構造は存在しない。著者らが記述した実験モデル系は,OprFのさらなる基礎研究の基礎を提供し,特に抗菌薬の標的としてのOprFの生物工学的開発のために基礎を提供する。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
分類
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蛋白質・ペプチド一般  ,  脂質一般  ,  有機化合物の薄膜 

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