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J-GLOBAL ID：201902224096268655   整理番号：19A1650709

休止ZAP70インタラクトームにより例示された蛋白質複合体の光制御親和性精製【JST・京大機械翻訳】

Light-Controlled Affinity Purification of Protein Complexes Exemplified by the Resting ZAP70 Interactome

著者 (20件)： Horner Maximilian (Faculty of Biology, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Horner Maximilian (Signalling Research Centres BIOSS and CIBSS, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Horner Maximilian (Spemann Graduate School of Biology and Medicine, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Eble Julian (Faculty of Biology, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Eble Julian (Signalling Research Centres BIOSS and CIBSS, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Yousefi O. Sascha (Faculty of Biology, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Yousefi O. Sascha (Signalling Research Centres BIOSS and CIBSS, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Yousefi O. Sascha (Spemann Graduate School of Biology and Medicine, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Schwarz Jennifer (Faculty of Biology, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Schwarz Jennifer (Spemann Graduate School of Biology and Medicine, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Warscheid Bettina (Faculty of Biology, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Warscheid Bettina (Signalling Research Centres BIOSS and CIBSS, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Warscheid Bettina (Spemann Graduate School of Biology and Medicine, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Weber Wilfried (Faculty of Biology, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Weber Wilfried (Signalling Research Centres BIOSS and CIBSS, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Weber Wilfried (Spemann Graduate School of Biology and Medicine, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Schamel Wolfgang W. A. (Faculty of Biology, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Schamel Wolfgang W. A. (Signalling Research Centres BIOSS and CIBSS, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Schamel Wolfgang W. A. (Spemann Graduate School of Biology and Medicine, University of Freiburg, Freiburg, Germany) ,  Schamel Wolfgang W. A. (Centre for Chronic Immunodeficiency CCI, Medical Center, University of Freiburg, Freiburg, Germany)
資料名： Frontiers in Immunology (Web)  (Frontiers in Immunology (Web))
巻： 10  ページ： 226  発行年： 2019年 
JST資料番号： U7074A  ISSN： 1664-3224  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 多蛋白質複合体は免疫系のリンパ球のような細胞の挙動を制御する。蛋白質複合体を精製し,質量分析によりそれらの相互作用を決定する方法は広く使用されている。これらの方法の一つの欠点は偽陽性の存在である。実際に,関心のある蛋白質(POI)の溶出は緩衝液の生化学的性質を変えることにより達成されるので,非特異的に結合した蛋白質(偽陽性)も溶出する可能性がある。ここでは,フィトクロームB(PhyB)とそのフィトクローム相互作用因子6(PIF6)との間の光調節可逆的蛋白質相互作用に基づく光遺伝子誘導および光制御親和性精製法を開発した。親和性タグとしてPOIに遺伝的に融合できる22個のアミノ酸のみからなるPIF6の切断変異体を設計した。それによって,POIは,結合と洗浄のために660nmの光を用いて,そして,溶出のために740nmの光を用いて,PhyB機能化樹脂材料によって精製することができた。遠赤光誘起溶離は効果的であるが,同じ緩衝液を洗浄と溶出に用いるので非常に温和である。概念実証として,ZAP70欠損Jurkat T細胞におけるチロシンキナーゼZAP70のPIF標識変異体を発現し,著者らの光制御系を用いてZAP70と会合蛋白質を精製し,定量的質量分析により相互作用パートナーを同定した。非刺激T細胞を用いて,既知の相互作用パートナーを検出し,他の全ての蛋白質を濾過できた。Copyright 2019 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *光制御 ,  *タンパク質複合体 ,  遺伝子 ,  フィトクローム ,  *親和性 ,  チロシンキナーゼ ,  質量分析 ,  アミノ酸 ,  溶出 ,  遺伝 ,  *タンパク質 ,  相互作用
準シソーラス用語： 誤検出 ,  *インタラクトーム ,  *ZAP70 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： 光遺伝学 ,  アフィニティー精製 ,  フィトクローム ,  ZAP70 ,  蛋白質-蛋白質相互作用 ,  質量分析

分類 (1件)： 免疫反応一般  (ED03010T)

引用文献 (43件)：

• Krogan NJ, Cagney G, Yu H, Zhong G, Guo X, Ignatchenko A, et al. Global landscape of protein complexes in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Nature (2006) 440:637-43. doi: 10.1038/nature04670
• Huttlin EL, Bruckner RJ, Paulo JA, Cannon JR, Ting L, Baltier K, et al. Architecture of the human interactome defines protein communities and disease networks. Nature (2017) 545:505-9. doi: 10.1038/nature22366
• Balagopalan L, Kortum RL, Coussens NP, Barr VA, Samelson LE. The linker for activation of T cells (LAT) signaling hub: from signaling complexes to microclusters. J Biol Chem. (2015) 290:26422-9. doi: 10.1074/jbc.R115.665869
• Lork M, Staal J, Beyaert R. Ubiquitination and phosphorylation of the CARD11-BCL10-MALT1 signalosome in T cells. Cell Immunol. (2018) [Epub ahead of print]. doi: 10.1016/j.cellimm.2018.11.001
• Chan AC, Iwashima M, Turck CW, Weiss A. Zap-70 - a 70 Kd protein-tyrosine kinase that associates with the Tcr Zeta-Chain. Cell (1992) 71:649-62. doi: 10.1016/0092-8674(92)90598-7

タイトルに関連する用語 (7件)： 休止 ,  ZAP70 ,  インタラクトーム ,  蛋白質複合体 ,  光制御 ,  親和性 ,  精製