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J-GLOBAL ID：201902224936350116   整理番号：19A1406701

生細胞における高速で不可逆的な生体直交共役のための相乗的”クリック”ボロナート/チオセミカルバゾン系【JST・京大機械翻訳】

Synergic “Click” Boronate/Thiosemicarbazone System for Fast and Irreversible Bioorthogonal Conjugation in Live Cells

著者 (6件)： Akgun Burcin (Department of Chemistry, University of Alberta, Alberta, Canada) ,  Li Caishun (Department of Chemistry, University of Alberta, Alberta, Canada) ,  Hao Yubin (Department of Chemistry, University of Alberta, Alberta, Canada) ,  Lambkin Gareth (Department of Chemistry, University of Alberta, Alberta, Canada) ,  Derda Ratmir (Department of Chemistry, University of Alberta, Alberta, Canada) ,  Hall Dennis G. (Department of Chemistry, University of Alberta, Alberta, Canada)
資料名： Journal of the American Chemical Society  (Journal of the American Chemical Society)
巻： 139  号： 40  ページ： 14285-14291  発行年： 2017年10月11日 
JST資料番号： C0254A  ISSN： 0002-7863  CODEN： JACSAT  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 非毒性試薬を用いた迅速,高収率及び選択的生物直交「クリック」反応は生細胞における生体分子の共役におけるそれらの大きな有用性に対して高い要求がある。多くのクリック反応がこの目的のために開発されているが,多くは単一または二重標識応用のための代替システムの開発を正当化する欠点と限界に関連している。最近の報告は,非生物的ボロン酸とジオール間の生物直交クリック反応としてのボロン酸エステル形成の可能性を強調した。ボロン酸エステル生成は速い脱水過程である。しかし,それは水性媒体中で本質的に可逆的である。著者らは,二つの二官能性試薬,チオセミカルバゾン-官能化ノopジオールおよびオルト-アセチルアリールボロン酸に基づく共同システムを設計し,最適化した。両試薬は化学的に安定で,50μMの濃度でHEK293T細胞に対して非毒性であることを示した。得られたボロン酸/チオセミカルバゾン付加物は,NMR分光法により測定された9M~-1s-1の速度定数で,中性緩衝液中で,低μM濃度で触媒なしで迅速かつ不可逆的に生成する中程度の環である。競合するボロン酸の存在下での対照実験は交差副産物を示さず,ボロン酸/チオセミカルバゾン抱合体の安定性と可逆性の欠如を確認した。抱合体の形成は,フルクトース,グルコース,及びカテコールのような生物学的ジオールの存在によって影響されず,チオセミカルバゾン官能化ノopジオールは,蛋白質結合グリオキシルユニット上に見出されたソートのアルデヒド求電子試薬に不活性である。生細胞の細胞表面標識化におけるこの系の適合性を,HEK293T細胞におけるBeta-2アドレナリン受容体の細胞外ドメイン上にボロン酸試薬を設置するためのSNAPタグ法を用いて示し,続いてフルオレセイン染料で標識化した最適チオセミカルバゾン官能化nopoldiol試薬とのインキュベーションを行った。蛍光顕微鏡による可視化の成功は10μMの低い試薬濃度で可能であり,生物学的応用におけるこのシステムの可能性を確認した。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： アルデヒド ,  インキュベート ,  官能化 ,  標識法 ,  蛍光顕微鏡 ,  NMR【磁気共鳴】 ,  *共役 ,  ジオール ,  *直交性 ,  可視化 ,  最適化 ,  ヘキソース ,  アルドース ,  ヒドラゾン ,  ウレア化合物 ,  有機硫黄化合物
準シソーラス用語： ボロン酸類 ,  *生細胞 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 生物物理的研究法  (EA03020V)

物質索引 (2件)： グルコース ,  チオセミカルバゾン

タイトルに関連する用語 (6件)： 生細胞 ,  不可逆 ,  生体 ,  共役 ,  クリック ,  チオセミカルバゾン