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J-GLOBAL ID：201902225605261034   整理番号：19A1805092

DNAメチルトランスフェラーゼ活性と阻害のためのナノ細孔に基づく無標識,実時間モニタリング分析【JST・京大機械翻訳】

Nanopore-Based, Label-Free, and Real-Time Monitoring Assay for DNA Methyltransferase Activity and Inhibition

著者 (6件)： Rauf Sana (Department of Chemistry, Key Laboratory of Bioorganic Phosphorus Chemistry & Chemical Biology, Tsinghua University, China) ,  Zhang Ling (Department of Chemistry, Key Laboratory of Bioorganic Phosphorus Chemistry & Chemical Biology, Tsinghua University, China) ,  Ali Asghar (Department of Chemistry, Key Laboratory of Bioorganic Phosphorus Chemistry & Chemical Biology, Tsinghua University, China) ,  Ahmad Jalal (Department of Chemistry, Key Laboratory of Bioorganic Phosphorus Chemistry & Chemical Biology, Tsinghua University, China) ,  Liu Yang (Department of Chemistry, Key Laboratory of Bioorganic Phosphorus Chemistry & Chemical Biology, Tsinghua University, China) ,  Li Jinghong (Department of Chemistry, Key Laboratory of Bioorganic Phosphorus Chemistry & Chemical Biology, Tsinghua University, China)
資料名： Analytical Chemistry  (Analytical Chemistry)
巻： 89  号： 24  ページ： 13252-13260  発行年： 2017年 
JST資料番号： A0395A  ISSN： 0003-2700  CODEN： ANCHAM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： DNAメチルトランスフェラーゼにより触媒されるDNAメチル化は多くの生物学的過程において重要な役割を果たす。しかしながら,DNAメチルトランスフェラーゼ活性のために提案された従来の分析は,面倒で不連続である。酵素結合反応と結合したナノ細孔法を用いたDNAアデニンメチルトランスフェラーゼ(Dam)の活性と動力学のリアルタイムモニタリングのための新しい方法を提案した。DamとMboI制限エンドヌクレアーゼの両方に対して認識配列5′-GATA-3′を有する二本鎖DNAプローブABを調製した。ダムは基質プローブABのメチル化を触媒し,それはMboIの開裂反応を阻止したが,Damの不在はMboIにより非メチル化プローブABの4つのssDNAフラグメントへの開裂をもたらした。ナノ細孔で試験した場合,二本鎖メチル化プローブABは長寿命事象を発生させ,小スパイク事象のみを生成するMboI開裂仲介ssDNAフラグメントから明確に識別された。提案した方法は,約150分の短い分析時間でDamに対して0.03U/mLの検出限界を有する。このセンシングシステムは,放射性物質の使用を容易にし,設計し,簡単に行うことができ,ヒト血清試料のような複雑なマトリックス中のDamの活性を効率的に検出することができる。さらに,新規抗癌剤の発見に役立つ可能性のあるDam標的阻害薬をスクリーニングする可能性がある。この方法は一般的であり,それらの対応するメチル化感受性エンドヌクレアーゼとのカップリングにより広範囲のメチルトランスフェラーゼの活性をモニターするために容易に拡張できる。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *メチルトランスフェラーゼ ,  メチル化 ,  触媒 ,  感受性 ,  プローブ ,  抗腫瘍薬 ,  検出限界 ,  *DNAメチルトランスフェラーゼ ,  DNA制限酵素 ,  *DNA【核酸】 ,  エンドヌクレアーゼ ,  一本鎖DNA
準シソーラス用語： DNAメチル化 ,  *無標識 ,  *ナノ細孔 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (8件)： DNAメチルトランスフェラーゼ ,  活性 ,  阻害 ,  ナノ細孔 ,  無標識 ,  実時間 ,  モニタリング ,  分析