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J-GLOBAL ID:201902225969456306   整理番号:19A1651331

miR-378a-5pはCDK1標的化により血管平滑筋細胞における増殖と移動を調節する【JST・京大機械翻訳】

MiR-378a-5p Regulates Proliferation and Migration in Vascular Smooth Muscle Cell by Targeting CDK1
著者 (10件):
資料名:
巻: 10  ページ: 22  発行年: 2019年 
JST資料番号: U7071A  ISSN: 1664-8021  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: スイス (CHE)  言語: 英語 (EN)
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【目的】血管平滑筋細胞(VSMCs)の異常増殖または移動は,血管病変につながり,アテローム性動脈硬化症およびステント再狭窄(IRS)をもたらす。本研究の目的は,VSMCs機能とIRSの調節におけるmiR-378a-5pとその標的の役割を確立することであった。【方法】EDUアッセイおよび細胞計数キット-8(CCK-8)分析を,VSMCs増殖を評価するために適用し,創傷治癒アッセイおよびトランスウェルアッセイを,細胞遊走を評価するために適用した。さらに,定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(qRT-PCR)を行い,miR-378a-5p IRS患者および健常人の発現レベルを調査した。標的遺伝子をTarget ScanとmiRソフトウェアを用いて予測し,候補遺伝子の生物学的機能をバイオインフォマティクス解析により探索した。さらに,RNA結合蛋白質免疫沈降(RIP)を行い,蛋白質とのmiRNA相互作用を分析した。免疫蛍光(IF)及び蛍光顕微鏡を用いて,下流標的CDK1によるmiR-378a-5pの結合特性,局在及び発現を測定した。【結果】miR-378a-5pの発現は,健常人と比較して,ステント再狭窄を有する群で増加し,また,血小板由来成長因子-BB(PDGF-BB)によって刺激されたVSMCsは,NCと比較して増加した。MiR-378a-5p過剰発現は増殖および遊走効果を有意に促進したが,miR-378a-5p阻害剤はVSMC増殖および遊走を抑制した。CDK1はVSMCsにおけるmiR-378a-5pの機能的標的であることが証明された。奨励的に,miR-378a-5pの発現は,健常人と比較して,ステント再狭窄患者において,また対照細胞と比較してPDGF-BB刺激VSMCsにおいて増加した。さらに,共トランスフェクション実験は,miR-378a-5p過剰発現がCDK1遺伝子発現レベルを低下させることにより,VSMCsの増殖と遊走を特異的に促進することを示した。結論:この研究において,miR-378a-5pは,CDK1/p21シグナル伝達経路を標的とすることによりVSMC増殖及び遊走を調節する重要なメディエーターであると結論した。したがって,miR-378a-5pを目的とした介入は,ステント再狭窄の予防および治療における治療的応用の可能性がある。Copyright 2019 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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