APE-1shRNAと過剰発現ベクターの構築と肝細胞の免疫炎症性因子、アポトーシスへの影響【JST・京大機械翻訳】

Zhu Yubing; Sun Zhipeng; A Minbuhe; Fan Qing; Wu Guangdong; Zhang Nengwei

文献

J-GLOBAL ID：201902233243574570 整理番号：19A1838457

APE-1shRNAと過剰発現ベクターの構築と肝細胞の免疫炎症性因子、アポトーシスへの影響【JST・京大機械翻訳】

Construction of APE-1 shRNA and Overexpression Vector in Hepatocytes and Its Influence on Immune Inflammatory Factors

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資料名：
巻： 48 号： 2 ページ： 137-142 発行年： 2019年
JST資料番号： C2694A ISSN： 1672-0741 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

目的:脱プリン/脱ピリミジンエンドヌクレアーゼ1(apurinic-apyrimidinicendonuclease1,APE-1)小ヘアピンRNA(shorthairpinRNA)を検討する。肝細胞の免疫炎症性因子発現およびアポトーシスに及ぼすshRNAおよび過剰発現ベクターの構築および効果を調査した。方法:遺伝子発現データベースGEOを用いて、肝移植免疫寛容患者及び非耐性患者の遺伝子発現プロファイルデータを取得し、R言語プログラムにより差次的発現遺伝子を分析し、肝移植免疫寛容関連遺伝子APE-1を獲得した。4つの平行なAPE-1shRNAベクター(APE-1shRNA_1,APE-1shRNA_2,APE-1shRNA_3,APE-1shRNA_4)を構築し,プラスミドの塩基配列決定と配列解析を行った。APE-1shRNAを,mRNA発現,ウエスタンブロット,およびウエスタンブロット法によって検出した。APE-1過剰発現ベクターを,構築して同定した。STRINGウェブサイトはAPE-1蛋白質相互作用ネットワークを予測する。【方法】APE-1shRNAと過剰発現ベクターを用いて,ヒト正常肝細胞L-02のAPE-1発現(対照群,APE-1サイレンシング群,APE-1過剰発現群)に介入し,IL-1β,IL-10,およびTNF-α,INF-γの発現,およびアポトーシスをフローサイトメトリーによって検出した。結果:35個の肝移植免疫寛容に関連する顕著な発現遺伝子を選別し、肝移植免疫寛容患者の高発現遺伝子APE-1を選択した。APE-1shRNA_1ベクターとAPE-1過剰発現ベクターを,APE-1のサイレンシング効果のために得た。APE-1はANP32A、FEN1、HMGB2、LIG1、MUTYH、NTHL1、OGG1、PCNA、POLB、SETなどのタンパク質と潜在的相互作用があると予測した。APE-1サイレンシングは,IL-1β,IL-10,TNF-α,およびINF-γの発現を有意に増加させたが,アポトーシス率は,L-02細胞(APE-1サイレンシング群)で有意に増加した。逆に、APE-1の過剰発現後(APE-1過剰発現群)L-02細胞の炎症性因子発現が著しく低下し、アポトーシス率が顕著に低下した。【結語】APE-1発現は,ヒト正常肝細胞株L-02細胞における炎症性サイトカイン発現およびアポトーシスに影響を及ぼし,それは,肝移植免疫寛容における鍵となる遺伝子である可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

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腫ようの化学・生化学・病理学 , 分子遺伝学一般

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