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J-GLOBAL ID:201902242540558597   整理番号:19A1755109

組換蛋白質の効率的一過性発現のためのNicotiana benthamianaにおけるRDR6遺伝子のCRISPR/Cas9仲介ノックアウト【JST・京大機械翻訳】

CRISPR/Cas9-mediated knockout of the RDR6 gene in Nicotiana benthamiana for efficient transient expression of recombinant proteins
著者 (2件):
資料名:
巻: 250  号:ページ: 463-473  発行年: 2019年 
JST資料番号: C0607A  ISSN: 0032-0935  CODEN: PLANAB  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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RDR6遺伝子ノックアウトNicotiana benthamiana植物はCRISPR/Cas9技術を用いて成功裏に生産された。植物における組換え蛋白質の生産は,安全性やコスト低減のような多くの利点を持っている。しかし,この技術,特に低レベルの蛋白質生産にはいくつかの問題がある。植物細胞におけるRNAサイレンシング機構の機能不全は,RNAサイレンシング機構がトランス遺伝子由来mRNAを効率的に分解するため,組換え蛋白質生産を改善するのに効果的である。したがって,この問題を克服するために,クラスタ化された規則的に間隔をあけた短いパリンdroリピート(CRISPR)/Cas9技術を用いて,RNAサイレンシング関連遺伝子ノックアウトトランスジェニックNicotiana benthamianaを開発した。RNAサイレンシング機構-ノックアウトN.benthamiana(ΔRDR6植物)の最も重要な成分の一つであるRNA依存RNAポリメラーゼ6(RDR6)の生産に成功した。ΔRDR6植物は異常な花を持ち,Arabidopsis RDR6変異体と同様に不稔性であった。しかしながら,一過性遺伝子発現アッセイは,ΔRDR6植物が野生型(WT)植物よりも大量の緑色蛍光蛋白質(GFP)とGFP mRNAを蓄積することを示した。小RNA配列解析により,GFP遺伝子に対する低分子干渉RNAのレベルはWT植物のそれと比較してΔRDR6植物において大きく減少することを明らかにした。これらの知見は,ΔRDR6植物がWT植物よりも大量の組換え蛋白質を発現でき,したがって組換蛋白質生産に有用であり,植物における遺伝的及び生理学的事象に対するRDR6の寄与を理解することを示す。Copyright 2019 Springer-Verlag GmbH Germany, part of Springer Nature Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子発現  ,  遺伝子操作 

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