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J-GLOBAL ID：201902243770201188   整理番号：19A2387620

PtCrustin2抗菌ペプチド遺伝子の最適化とPichiapastorisにおける高効率発現を示した。【JST・京大機械翻訳】

Gene optimization for swimming crab PtCrustin2 antimicrobial peptide and its efficient expression in Pichia pastoris

著者 (2件)： Wang Yanhui (上海海洋大学 食品学院 上海水産品加工及貯藏工程技術研究中心,上海,201306) ,  Tao Yan (上海海洋大学 食品学院 上海水産品加工及貯藏工程技術研究中心,上海,201306)
資料名： Shengwu Xue Zazhi  (Shengwu Xue Zazhi)
巻： 36  号： 4  ページ： 42-46  発行年： 2019年 
JST資料番号： C2987A  ISSN： 2095-1736  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： Crustinは、一連のシステインに富む甲殻類由来の抗菌ペプチドであり、甲殻類の非特異的免疫メカニズムにおける重要な免疫因子であり、その生物学的機能はC末端の成熟ペプチド領域によって決定される。Portunustrituberculatus(Portunustrituberculatus)のcDNA配列に基づいて,Pichiapastoris(Pichiapastoris)のコドン選好性に従って,関連コドンを最適化して,Portunustrituberculatus(Portunustrituberculatus)のcDNA配列を決定した。XhoI制限部位とKex2シグナルペプチド切断部位、3’’末端XbaI制限性部位と6×hisタグを含む目的遺伝子“smPtCrustin2”を合成した。pPICZαAを発現ベクターとし、組換え発現ベクターpPICZαA-smPtCrustin2を構築し、それをPichiapastorisX-33細胞に移入した後、高濃度のブレオマイシンを含む耐性平板により高コピーメタノールを選別し、高速型酵母形質転換体を利用した。酵母形質転換体を28°C,250r/minでスクリーニングし,0.5%メタノールを用いて標的蛋白質を発現し,固定化金属イオンアフィニティークロマトグラフィー(IMAC)により精製した。Tricine-SDS-PAGE分析により、精製組換え体smPtCrustin2の分子量は約9.6kuであり、分子量約20kuの二量体を形成することが分かった。WesternBlot分析により、精製産物が予期した目的タンパク質であることがさらに証明された。Pichiapastoris発現系は22.4mg/Lの組換え体smPtCrustin2を得た。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 酵母 ,  シグナルペプチド ,  コドン ,  *ペプチド ,  *遺伝子 ,  *最適化 ,  分子量 ,  生物活性 ,  高速度 ,  甲殻類 ,  ブレオマイシン ,  脂肪族アミン ,  チオール ,  脂肪族カルボン酸 ,  含硫アミノ酸 ,  第一アミン
準シソーラス用語： 固定化 ,  発現ベクター ,  *抗菌ペプチド , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (3件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

物質索引 (1件)： システイン

タイトルに関連する用語 (5件)： 抗菌ペプチド ,  遺伝子 ,  最適化 ,  高効率 ,  発現