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J-GLOBAL ID：201902248737286922   整理番号：19A1475241

凍結融解した黒毛和種雄牛精子に対するフルオレセインインイソチオシアナートナンキンマメ凝集素(FITC-PNA)先体完全性染色の方法論的改善

Methodological improvement of fluorescein isothiocyanate peanut agglutinin (FITC-PNA) acrosomal integrity staining for frozen-thawed Japanese Black bull spermatozoa

著者 (8件)： RAJABI-TOUSTANI Reza (Laboratory of Veterinary Theriogenology, Joint Department of Veterinary Medicine, Faculty of Applied Biological Sciences, Gifu University, Gifu 501-1193, Japan) ,  AKTER Quzi Sharmin (Laboratory of Veterinary Theriogenology, Joint Department of Veterinary Medicine, Faculty of Applied Biological Sciences, Gifu University, Gifu 501-1193, Japan) ,  ALMADALY Essam A. (Department of Theriogenology, Faculty of Veterinary Medicine, Kafrelsheikh University, El-Geish street, 33516 Kafrelsheikh, Egypt) ,  HOSHINO Yoichiro (Hida Beef Cattle Research Department, Gifu Prefectural Livestock Research Institute, Takayama 506-0101, Japan) ,  HOSHINO Yoichiro (Present address: Graduate School of Agriculture, Kyoto University, Kyoto 622-0203, Japan) ,  ADACHI Hiromichi (Hida Beef Cattle Research Department, Gifu Prefectural Livestock Research Institute, Takayama 506-0101, Japan) ,  MUKOUJIMA Koushi (Hida Beef Cattle Research Department, Gifu Prefectural Livestock Research Institute, Takayama 506-0101, Japan) ,  MURASE Tetsuma (Laboratory of Veterinary Theriogenology, Joint Department of Veterinary Medicine, Faculty of Applied Biological Sciences, Gifu University, Gifu 501-1193, Japan)
資料名： Journal of Veterinary Medical Science (Web)  (Journal of Veterinary Medical Science (Web))
巻： 81  号： 5  ページ： 694-702(J-STAGE)  発行年： 2019年 
JST資料番号： U1094A  ISSN： 1347-7439  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 日本 (JPN)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 本検討の目的はフルオレセインイソチオシアナート-共役ナンキンマメ凝集素(FITC-PNA)を用いて凍結融解した黒毛和種の精子先体の染色を改善することであった。精子を洗浄し,10,20および30分間懸濁液中において1~3%のパラホルムアルデヒド(PFA)で固定し,5分間,0~2%のトリトンX-100で透過し,懸濁液(懸濁液中)またはスミア(スミア上)において,種々の抗退色剤(0.22Mの1,4-ジアザビシクロ[2,2,2]オクタン(DABCO),SlowFadeおよびProLong)を添加した。精子を24時間の貯蔵の直後または後の7つのパターンに分類した。実験1は,1)懸濁中法がスミア上法より良く,2)懸濁中法を用いて精子を染色し,すぐに検査すると,最も良い抗退色剤はSlowFadeであり,3)スミア上法を用いて染色後に試料を保存する場合,DABCOは避けるべきであり,4)懸濁中法を用いて精子を染色した場合,染色試料の貯蔵は推奨できなく,5)懸濁中法を用いて染色後に試料を保存する場合,ProLongが最良の抗退色剤である可能性があることを示した。実験2の結果はTritonX-100の濃度を1%から0.1に減少できることを示した。実験3の結果は30分間の固定に用いたパラホルムアルデヒド濃度を3から2%に減少できることを示した。改良型の染色プロトコルは雄牛精子先体の完全性を測定するのに有効であると期待される。(翻訳著者抄録)

シソーラス用語： 黒毛和種 ,  *組織保存 ,  *凍結保存 ,  精子 ,  蛍光標識 ,  *レクチン ,  生体試料染色 ,  人工受精 ,  *精子凍結保存 ,  先体 ,  *ピーナッツ凝集素 ,  肉牛 ,  ラクトン ,  スピロ化合物 ,  フェノール類 ,  無機酸エステル ,  有機硫黄化合物 ,  芳香族縮合化合物 ,  有機シアン化合物
準シソーラス用語： *ナンキンマメ凝集素

著者キーワード (3件)： 先体の完全性 ,  ウシ精子 ,  FITC-PNA染色

分類 (1件)： 繁殖管理  (FD01030C)

物質索引 (1件)： フルオレセインイソチオシアナート

引用文献 (22件)：

• 1. Almadaly, E., El-Kon, I., Heleil, B., Fattouh, S., Mukoujima, K., Ueda, T., Hoshino, Y., Takasu, M. and Murase, T. 2012. Methodological factors affecting the results of staining frozen-thawed fertile and subfertile Japanese Black bull spermatozoa for acrosomal status. Anim. Reprod. Sci. 136: 23-32.
• 2. Freneau, G. E., Chenoweth, P. J., Ellis, R. and Rupp, G. 2010. Sperm morphology of beef bulls evaluated by two different methods. Anim. Reprod. Sci. 118: 176-181.
• 3. Gennuso, F., Fernetti, C., Tirolo, C., Testa, N., L’Episcopo, F., Caniglia, S., Morale, M. C., Ostrow, J. D., Pascolo, L., Tiribelli, C. and Marchetti, B. 2004. Bilirubin protects astrocytes from its own toxicity by inducing up-regulation and translocation of multidrug resistance-associated protein 1 (Mrp1). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101: 2470-2475.
• 4. Gürler, H., Calisici, O. and Bollwein, H. 2015. Inter- and intra-individual variability of total antioxidant capacity of bovine seminal plasma and relationships with sperm quality before and after cryopreservation. Anim. Reprod. Sci. 155: 99-105.
• 5. Harayama, H., Nishijima, K., Murase, T., Sakase, M. and Fukushima, M. 2010. Relationship of protein tyrosine phosphorylation state with tolerance to frozen storage and the potential to undergo cyclic AMP-dependent hyperactivation in the spermatozoa of Japanese Black bulls. Mol. Reprod. Dev. 77: 910-921.

タイトルに関連する用語 (11件)： 凍結融解 ,  黒毛和種 ,  雄牛 ,  精子 ,  凝集素 ,  FITC ,  PNA ,  先体 ,  完全性 ,  染色 ,  方法論