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J-GLOBAL ID:201902249882236095   整理番号:19A0269316

ヒツジ雑種羊のSP-A遺伝子クローニングと真核発現【JST・京大機械翻訳】

Cloning and eukaryotic expression of SP-A in argali hybrid sheep
著者 (2件):
資料名:
巻: 36  号:ページ: 309-314  発行年: 2018年 
JST資料番号: C3206A  ISSN: 1007-7383  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的:ヒツジの雑種羊の肺サーファクタント関連タンパク質A(Pulmonarysurfactant-associatedproteinA,SP-A)遺伝子に対してクローニングと真核発現を行う。方法:ヒツジのヒツジの肺組織を採集し、総RNAを抽出し、RT-PCR法を用いて、SP-A遺伝子のORF配列をクローニングし、塩基配列決定し、それをpPIC9Kベクターにサブクローニングし、pPIC9K-SP-A真核発現プラスミドを構築した。このプラスミドをPichiapastorisGS115に導入し、メタノールで誘導し、真核発現を行い、最後にSDS-PAGEとwesternblotを用いて目的タンパク質を検査・同定した。結果:増幅された遺伝子断片は配列アラインメント後、SP-A遺伝子のORF配列と一致し、構築した真核発現プラスミドpPIC9K-SP-Aはダブル酵素消化とシークエンシングにより同定に成功し、真核発現産物はSDS-PAGE分析で、大きさは27であった。33kDの目的バンド、westernblot鑑定により、1本の27.33kDの目的タンパク質バンドも見られた。【結語】本研究は,SP-A遺伝子のORF配列を首尾よくクローニングし,そして,SP-A蛋白質の構造と機能を研究するための基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (2件):
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分子遺伝学一般  ,  ウイルスによる動物の伝染病 
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