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J-GLOBAL ID：201902251986423370   整理番号：19A0179097

指向性進化と計算指向蛋白質設計を用いた熱安定性ケト酸デカルボキシラーゼのエンジニアリング【JST・京大機械翻訳】

Engineering a Thermostable Keto Acid Decarboxylase Using Directed Evolution and Computationally Directed Protein Design

著者 (11件)： Soh Lemuel M. J. (Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of California, Los Angeles) ,  Mak Wai Shun (Department of Chemistry, Biochemistry & Molecular Medicine, and the Genome Center, University of California Davis, California, United States) ,  Lin Paul P. (Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of California, Los Angeles) ,  Mi Luo (Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of California, Los Angeles) ,  Chen Frederic Y.-H. (Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of California, Los Angeles) ,  Damoiseaux Robert (Department of Molecular and Medicinal Pharmacology, University of California, Los Angeles) ,  Damoiseaux Robert (California NanoSystems Institute, California, United States) ,  Siegel Justin B. (Department of Chemistry, Biochemistry & Molecular Medicine, and the Genome Center, University of California Davis, California, United States) ,  Liao James C. (Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of California, Los Angeles) ,  Liao James C. (UCLA-DOE Institute of Genomics and Proteomics, California, United States) ,  Liao James C. (Academia Sinica, R.O.C)
資料名： ACS Synthetic Biology  (ACS Synthetic Biology)
巻： 6  号： 4  ページ： 610-618  発行年： 2017年 
JST資料番号： W5048A  ISSN： 2161-5063  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 短報  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ケト酸デカルボキシラーゼ(KDC)は,イソブタノールのようなケト酸誘導高級アルコールの生産において重要な酵素である。最も活性なKDCは,中ophilesで見られた。好熱性物質におけるKDC活性の報告は2桁少ない。したがって,中温KDCの熱安定性はイソブタノール生産温度を制限する。ここでは,60°Cで1時間のプレインキュベーション後に10.5倍の残存活性を増加させた熱安定性2-ケトイソバレラートデカルボキシラーゼ(Kivd)の開発を報告する。中温性Lactococcus lactis Kivdから出発して,ランダム変異誘発を用いてライブラリーを作成し,約8,000の独立変異体をスクリーニングした。トップ単一突然変異体を再結合した。さらに,熱安定性を改善するために,Rosetta Comparative Modelingを用いて構築された16の設計をスクリーニングし,最も活性なものを再結合して,著者らの最良の変種,LLM4を形成した。野生型Kivdと比較して,13°Cでの融解温度の上昇と60°Cでの半減期の4倍以上の増加が観察された。LLM4はリグノセルロース好熱性物質におけるケト酸誘導アルコール生産に有用である。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 中温 ,  半減期 ,  再結合 ,  野生型 ,  *ケト酸 ,  乳酸連鎖球菌 ,  融点 ,  アルコール ,  酵素 ,  リグノセルロース ,  好熱性 ,  耐熱性 ,  *カルボキシリアーゼ ,  *熱安定性
準シソーラス用語： ランダム変異誘発 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： 耐熱性 ,  ケト酸デカルボキシラーゼ ,  ハイスループットスクリーニング ,  蛋白質設計 ,  有向進化 ,  イソブチルアルコール

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  微生物代謝産物の生産  (FK03020A)

タイトルに関連する用語 (7件)： 指向性進化 ,  計算 ,  蛋白質設計 ,  熱安定性 ,  ケト酸 ,  デカルボキシラーゼ ,  エンジニアリング