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J-GLOBAL ID:201902252257854435   整理番号:19A1804291

毛管ゾーン電気泳動-タンデム質量分析を用いて25NG HeLaダイジェストから同定された10000ペプチド以上の被覆キャピラリーの調製のための表面制限水可逆付加-フラグメンテーション連鎖移動(SCARAFT)重合法【JST・京大機械翻訳】

Surface-Confined Aqueous Reversible Addition-Fragmentation Chain Transfer (SCARAFT) Polymerization Method for Preparation of Coated Capillary Leads to over 10 000 Peptides Identified from 25 ng HeLa Digest by Using Capillary Zone Electrophoresis-Tandem Mass Spectrometry
著者 (3件):
資料名:
巻: 89  号: 12  ページ: 6774-6780  発行年: 2017年 
JST資料番号: A0395A  ISSN: 0003-2700  CODEN: ANCHAM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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キャピラリー電気泳動(CZE)に使用するためにキャピラリーを被覆するために,表面拘束水性可逆的付加-フラグメンテーション連鎖移動(SCARAFT)重合法を開発した。SCARAFT重合は溶液中の代わりにキャピラリーの内部表面上で主に起こり,被覆の均一性を大きく改善した。この被覆で処理されたキャピラリーは2.8±0.2×10~6cm~2V~-1s-1(N=3)の電気浸透移動度を生み出し,これは市販線状ポリアクリルアミド(LPA)被覆キャピラリーのそれより約1桁低い。被覆キャピラリーを,CZEを用いたボトムアッププロテオーム解析のために評価した。非常に低い電気浸透移動度は200分の分離をもたらし,単一ショット分析を改善した。平均977の蛋白質グループと5605のユニークなペプチドを,50ngの消化物から同定し,2158の蛋白質グループと1005のペプチドを,Q Exactive HF質量分析計に結合したSCARAFT-アクリルアミドキャピラリーを用いた単一ショット分析を用いて,25ngのHeLa消化物から同定した。コーティングは安定である。連続操作の200時間(8.4日)にわたり,単一キャピラリーを用いた。移動時間におけるRSDは,6つのイオンに対して発生した選択イオン電気泳動図(SIEs)に対して2~3%の間であった。理論段数の中央値は,これらのSIEsに対して2400~60000の範囲であった。重合混合物中の官能性ビニル単量体を簡単に変えることにより,種々のタイプの被覆を調製できた。ブロック共重合体の直接付着と形成を用いた正に帯電した被覆を調製し,無傷蛋白質の混合物の分離のために実証した。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
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蛋白質・ペプチド一般  ,  電気泳動分析  ,  質量分析 
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