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J-GLOBAL ID:201902253603146365   整理番号:19A2536060

ヒトADAM17プロモータールシフェラーゼレポータープラスミドの構築と同定【JST・京大機械翻訳】

Construction and identification of luciferase reporter plasmid for human ADAM17 promoter
著者 (5件):
資料名:
巻: 39  号:ページ: 1305-1309  発行年: 2019年 
JST資料番号: C2932A  ISSN: 1001-6325  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的:ヒト脱インテグリン-メタロプロテイナーゼ17(ADAM17)プロモーターのルシフェラーゼレポータープラスミドを構築し、異なる部位に対して部位特異的突然変異を行い、その転写活性を分析する。【方法】ADAM17プロモーター領域のフォークヘッド転写因子M1(FoxM1)の結合部位をバイオインフォマティクスによって分析し,ヒト胃癌細胞株MGC-803のゲノムをテンプレートとして,ADAM17遺伝子プロモーター-1365-+51フラグメントをPCRによって増幅した。ルシフェラーゼレポーター遺伝子ベクターpGL3-basicに接続した。FoxM1結合の3つの部位に部位特異的突然変異を行った。293T細胞にトランスフェクションした後、二重ルシフェラーゼレポーターシステムにてその転写活性を分析した。【結果】塩基配列決定の結果,ADAM17プロモータールシフェラーゼレポーター遺伝子とその変異体が首尾よく構築されたことが示された。pGL3-basic群と比較して,pGL3-ADAM17(-1365-+51)群のルシフェラーゼ活性は有意に増加した(P<0.05)。【結果】対照群と比較して,FoxM1過剰発現群のルシフェラーゼ活性は有意に増加し(P<0.05),pGL3-ADAM17(-1365-+51)群は突然変異群よりも有意に高かった(P<0.05)。結論:ヒトADAM17プロモータールシフェラーゼレポーター遺伝子及びその突然変異体の構築に成功し、ADAM17が転写因子FoxM1の転写調節を受けることを初歩的に検証した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分子遺伝学一般 
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