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J-GLOBAL ID:201902256449916966   整理番号:19A0181617

等温酵素フリー連結ハイブリダイゼーション連鎖反応によるDNAメチルトランスフェラーゼ活性と阻害の評価【JST・京大機械翻訳】

Evaluation of DNA Methyltransferase Activity and Inhibition via Isothermal Enzyme-Free Concatenated Hybridization Chain Reaction
著者 (5件):
資料名:
巻:号:ページ: 932-939  発行年: 2017年 
JST資料番号: W5046A  ISSN: 2379-3694  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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メチルトランスフェラーゼ(MTase)触媒DNAメチル化は,重要な疾患の生物学的後成的過程において重要な役割を果たし,注目を集めており,臨床疾患診断および治療におけるMTase活性の増幅された検出を行っている。ここでは,連結ハイブリダイゼーション連鎖反応(C-HCR)媒介Foerster共鳴エネルギー移動(FRET)に基づくMTase活性を分析するための等温,酵素フリーおよび自律的戦略を開発した。MTase(Dam)を含まない典型的なC-HCR法において,Y形開始剤DNAは上流hCR-1を活性化し,下流のHCR-2を活性化し,蛍光体ドナー/アクセプタ(FAM/TAMRA)対を密接に近接させ,増幅FRET読み出しシグナルの生成をもたらす。標的Dam MTaseと補助DpnIエンドヌクレアーゼは,それぞれY字型開始剤オリゴヌクレオチドを連続的かつ特異的に認識/メチル化し,切断し,C-HCR過程とFRETシグナル生成を阻害し,MTaseアッセイのためのシグナル伝達プラットフォームの構築をもたらした。著者らの提案した等温酵素フリーC-HCR増幅アプローチは,MTase阻害剤をスクリーニングするためにさらに利用された。さらに,提案したC-HCRアプローチは,他の異なるMTasesのプローブに容易に適用でき,「プラグアンドプレイ」フォーマットによりY字型開始剤DNAの認識配列を変えることにより,対応する阻害剤をスクリーニングすることができる。それは,様々な生体形質転換の高感度検出のための汎用でロバストなツールを提供し,臨床評価と診断において大きな有望性を有する。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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酵素一般 

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