文献

J-GLOBAL ID：201902257905071567   整理番号：19A1148743

cxcr2遺伝子修飾マウス骨髄間葉系幹細胞の構築と同定【JST・京大機械翻訳】

Construction and identification of cxcr2 gene in modification mouse bone marrow mesenchymal stem cells

著者 (6件)： Zhang Li (空軍軍医大学西京医院麻醉与囲術期医学科,陜西 西安,710032) ,  Liu Yongfei (空軍軍医大学唐都医院麻醉科,陜西 西安,710038) ,  Ye Chuantao (空軍軍医大学唐都医院伝染科,陜西 西安,710038) ,  Bian Peiyu (空軍軍医大学唐都医院伝染科,陜西 西安,710038) ,  Lei Yingfeng (空軍軍医大学微生物学教研室,陜西 西安,710032) ,  Hou Lichao (空軍軍医大学西京医院麻醉与囲術期医学科,陜西 西安,710032)
資料名： Weishengwu Xue Mianyi Xue Jinzhan  (Weishengwu Xue Mianyi Xue Jinzhan)
巻： 47  号： 1  ページ： 19-25  発行年： 2019年 
JST資料番号： C3784A  ISSN： 1005-5673  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:マウスCXC型ケモカイン受容体2(CXCR2)遺伝子cxcr2が過剰発現する骨髄間葉系幹細胞(Bonemarrowmes-enchymalstemcell、BMSC)を構築し、同定する。【方法】マウスBMSCを全骨髄接着法で分離し,フローサイトメトリーにより幹細胞抗原1(stemcellantigen-1,SCA-1),CD44,CD43,CD45,IA/IE発現率を測定し,骨形成分化を誘導した。マウスcxcr2を含むプラスミドをテンプレートとしてPCR増幅を行い、得られたcxcr2をレンチウイルスベクターにクローニングし、pLenti-cxcr2-GZと命名した。レンチウイルスパッケージプラスミドをHEK-293T細胞に同時形質移入し、レンチウイルスを収穫後、遠心法によりBMSCに感染させ、1μg/mLzeocin圧力選択により、CXCR2を安定発現するマウスBMSC(CXCR2-BMSC)を樹立した。フローサイトメトリーとRT-PCRを用いて、それぞれCXCR2タンパク質とmRNA発現レベルを測定し、Transwell走化実験によりその移動能力を測定した。結果:90%以上の第3世代BMSCはCD44、SCA-1を発現し、IA/IE、CD34、CD45をほとんど発現せず、骨形成分化の誘導に成功した。菌液PCR、プラスミド二重酵素消化後、アガロースゲル電気泳動鑑定の結果、特異性、大きさの正しいバンド及びシークエンシング鑑定が正確であり、pLenti-cxcr2-GZ発現プラスミドの構築に成功した。フローサイトメトリーとRT-PCRの結果,CXCR2-BMSCのCXCR2蛋白質とmRNA発現レベルは,対照群に比して有意に高かった(P<0.001)。Transwellの結果,CXCR2-BMSCの遊走能は,対照群に比して有意に高かった(P<0.01)。結論:レンチウイルス系を用いて、CXCR2を安定的に発現するBM-SCの構築に成功し、cxcr2遺伝子修飾BMSCはBMSCの遊走能力を明らかに増加できる。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *骨髄 ,  CD34抗原 ,  レンチウイルス ,  *遺伝子 ,  プラスミド ,  トランスフェクション ,  フローサイトメトリー ,  RT-PCR法 ,  *マウス ,  骨形成 ,  CD45抗原 ,  PCR法
準シソーラス用語： mRNA発現 ,  レンチウイルスベクター ,  過剰発現 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (2件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (7件)： CXCR2 ,  遺伝子 ,  修飾 ,  マウス ,  骨髄間葉系幹細胞 ,  構築 ,  同定