抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】SD雄ラットの3つの新規蛋白質構成GnRH抗原の免疫学的および生物学的効果を比較する。本研究では、新しいタンパク質配置GnRH抗原設計にGnRHコピー数と抗原分子量を増加させる方法を採用した。G6K-GnRH並列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)を,新規蛋白質GnRH抗原調製の基本単位として,化学合成法で合成した。G6KTを二量化し、抗原I(G6KTD)を形成し、G6KTとG6KTDをそれぞれ卵白アルブミン(OVA)と共役させ、それぞれ抗原Π(G6KT-OVA)と抗原III(G6KTD-OVA)を形成した。5群;完全対照群(いかなる処理もしない,intactcontrol),外科去勢群(surgicalcastrates)および3種類の新蛋白配置GnRH免疫群(G6KTD,P>0.05)。G6KT-OVAとG6KTD-OVA免疫群。(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)の3種類の新しい蛋白配置GnRH抗原をSpecolアジュバントに配合し、それぞれSD雄マウスを免疫し、6週齢で初免した。足の筋肉に1mLの乳化抗原(相応の新構成のGn-RH蛋白100μgを含む)を注射し、8週間後で免除し、注射の用量と方法は同じ初の免疫をし、各実験群の12匹の雄のラット。血清抗体および生殖ホルモン濃度を,免疫測定法および酵素結合免疫測定法によって測定し,そして,下垂体-精巣の生殖関連遺伝子mRNA発現を,qPCRにより検出した。【結果】1)SD雄マウスは,3つの新規蛋白質配置のGnRH抗原を能動的に免疫した後,良好な抗体反応を示した。2)G6KT-OVAおよびG6KTD-OVA免疫群は,高レベルの抗体産生を誘発し,血清LH,FSH,テストステロン(T)およびインヒビンB(INHB)濃度を有意に減少させた(P<0.05)。実験の終わりに、この2種類の抗原免疫組雄ラットの睾丸重量及び体積はすべて低下し、精子の発生は完全に終止され、下垂体GnRHR、LHβ、FSHβ及び睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及びINHβBmRNAの発現は著しく下がった(P<0。05)。3)G6KTD免疫組12匹の雄ラットのうち、9匹(75%)は免除後血清LH、FSH、T及びINHB濃度が著しく低下し(P<0.05)、試験終了時の睾丸重量及び体積はいずれも顕著に低下し(P<0.05)、精子の発生は顕著に抑制された(P<0.05)。05)。まとめる。G6KT-OVAとG6KTD-OVAは強い免疫原性を持ち、初回免疫は生殖ホルモン分泌抑制の目的を達成でき、単剤量のGnRHワクチンとして良好な開発の将来性がある。同時に、G6KTDも強い免疫原性を持ち、キャリアータンパク質と単独にGnRH去勢抗原として、GnRH分子とベクタータンパク質とのカップリングが直面するGnRH抗原の損失が深刻であることと、キャリアタンパク質と共役した後続の精製などの問題を回避できる。本研究結果は高効率GnRH去勢ワクチンの開発及び大規模応用に理論的参考を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】