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J-GLOBAL ID：201902259002900994   整理番号：19A1804368

DNA-Agナノクラスタ分子ビーコン及びエキソヌクレアーゼIII支援シグナル増幅に基づく転写因子の高感度及び無標識蛍光検出【JST・京大機械翻訳】

Sensitive and Label-Free Fluorescent Detection of Transcription Factors Based on DNA-Ag Nanoclusters Molecular Beacons and Exonuclease III-Assisted Signal Amplification

著者 (10件)： Li Bingzhi (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Xu Lei (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Chen Yue (Department of Nutrition and Food Safety, School of Public Health, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Zhu Wanying (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Shen Xin (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Zhu Chunhong (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Luo Jieping (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Li Xiaoxu (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Hong Junli (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China) ,  Zhou Xuemin (School of Pharmacy, Nanjing Medical University, People’s Republic of China)
資料名： Analytical Chemistry  (Analytical Chemistry)
巻： 89  号： 14  ページ： 7316-7323  発行年： 2017年 
JST資料番号： A0395A  ISSN： 0003-2700  CODEN： ANCHAM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 転写因子(TF)は調節領域への結合により遺伝子発現を調節し,それらの調節異常は多数の疾患に関与する。したがって,それらは治療標的および潜在的診断マーカーである。しかし,TF検出のために広く使用されている方法は,厄介かコストがかかる。ここでは,最初に,TF分析にDNA-Agナノクラスタ分子ビーコン(AgMB)を適用し,AgMBの切り替え可能な蛍光に基づく分析を設計した。TFが存在しないと,エキソヌクレアーゼIII(Exo III)消化下で二本鎖DNAプローブ(dsTFプローブと呼ぶ)からレポーターとして機能する一本鎖DNAが放出される。次に,レポーターはAgMBにおけるグアニンに富むエンハンサー配列を連続的に消費することにより下流Exo III支援シグナル増幅を誘発し,最終的に有意な蛍光減少をもたらす。逆に,TFの存在は,消化からdsTFプローブを保護し,高蛍光状態を維持するために下流反応をブロックする。この根拠を証明するために,モデルTFとして核因子カッパB p50(NF-κB p50)を用いた。増幅戦略により,この方法はNF-κB p50に対して高い感度を示し,検出限界は10pM,広い直線範囲は30pMから1.5nMであった。さらに,この方法は,ヒト結腸癌DLD-1細胞における複数のTFを検出し,刺激後の細胞レベルの変化を反映することができた。最後に,阻害アッセイを行うことにより,TFs標的薬物のスクリーニング及び対応する阻害剤のIC50の計算に対するこの方法の可能性を明らかにした。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ナノクラスタ ,  プローブ ,  エンハンサー領域 ,  *蛍光 ,  検出限界 ,  ヒト ,  *DNA【核酸】 ,  *拡大 ,  遺伝子発現 ,  *エキソヌクレアーゼ ,  窒素複素環化合物 ,  ヒドロキシ化合物
準シソーラス用語： 阻害剤 ,  p50 ,  *無標識 ,  *分子ビーコン , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (2件)： 分光分析  (CC03012W) ,  核酸一般  (EB04010U)

物質索引 (1件)： グアニン

タイトルに関連する用語 (12件)： DNA ,  Ag ,  ナノクラスタ ,  分子ビーコン ,  エキソヌクレアーゼIII ,  支援 ,  シグナル ,  増幅 ,  転写因子 ,  高感度 ,  無標識 ,  蛍光検出