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J-GLOBAL ID:201902259564660566   整理番号:19A0730782

コーヒー葉(Coffea arabica L.)における単純で効率的な農業浸透法:導入遺伝子発現に影響する因子の評価【JST・京大機械翻訳】

A simple and efficient agroinfiltration method in coffee leaves (Coffea arabica L.): assessment of factors affecting transgene expression
著者 (6件):
資料名:
巻:号: 11  ページ: 1-10  発行年: 2018年 
JST資料番号: W3974A  ISSN: 2190-5738  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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簡単で迅速で効率的な一時的発現システムの確立は,コーヒーバイオテクノロジーにおける候補遺伝子の機能的検証のための必要なツールである。分離コーヒー葉における導入遺伝子発現に及ぼすAgrobacterium株,ドナー植物の年齢,浸透法,および浸透培地の影響を評価した。Agrobacterium株の効果に関して,uidAの発現は,LBA4404およびATHV処理サンプルよりも,GV3101処理コーヒーディスクにおいて高かった。一方,uidAの一時的発現は,成熟組織(12週齢)(1.6±1.2%)よりも若い植物(6週齢)(13.1±1.4%)からの葉ディスクにおいて有意に高かった。一時的uidA発現は,30g/Lショ糖,1.9g/L MES及び200uM ASを添加したMS塩に懸濁した15μLのAgrobacterium株GV3101:1303の1回の注入で浸透した若い植物からの分離コーヒー葉ディスクにおいて高かった。最適化されたプロトコルを用いて,uidA遺伝子の発現は細菌注射の6,24および48時間後および5週間後に観察された。陽性GUS発現を有するコーヒーディスクからDNAを抽出し,特異的なmgfp5およびuidAフラグメントを5週間後に増幅した。一方,最適化されたプロトコルを用いて,特異的cry10Aa(500bp)フラグメントを,プラスミドpB42-35S-cry10Aaによる農業浸透後5週間の農業浸透コーヒー葉ディスクにおいて増幅した。さらに,2つの浸透コーヒー葉ディスクにおける遺伝子cry10Aaの発現をRT-PCRにより検証し,予想される500bpフラグメントを増幅した。Copyright 2018 Springer-Verlag GmbH Germany, part of Springer Nature Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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JSTが定めた文献の分類名称とコードです
遺伝子操作  ,  遺伝子発現 

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