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J-GLOBAL ID:201902262740146686   整理番号:19A2105151

miR-199a-3p阻害はMEF2Cの促進を介して胚幹細胞の心筋細胞分化を促進する【JST・京大機械翻訳】

MiR-199a-3p inhibition facilitates cardiomyocyte differentiation of embryonic stem cell through promotion of MEF2C
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資料名:
巻: 234  号: 12  ページ: 23315-23325  発行年: 2019年 
JST資料番号: E0042B  ISSN: 0021-9541  CODEN: JCLLA  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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マイクロRNA(miRNA)は,内因性調節因子として転写後レベルで標的メッセンジャーRNA(mRNA)の発現を阻害する低分子(19-25ヌクレオチド)非コードRNAである。miR-199a-3pは複数の腫瘍の発生に有意な効果を有するという証拠が増加している。しかし,胚性幹細胞の心筋分化におけるmiR-199a-3pの特異的役割はまだ研究されていなければならない。懸垂滴の方法を用いて幹細胞の心筋細胞分化のモデルを構築し,胚様体(EB)の拍動率を計算した。細胞内MEF2C,a-MHC,GATA4,Nkx2.5およびcTnT mRNAのレベルをリアルタイム定量的ポリメラーゼ連鎖反応によって測定し,一方,miR-199a-3pの発現を同時に検出した。MEF2C,a-MHC,GATA4,Nkx2.5及びcTnTの蛋白質レベルをウェスタンブロット分析により定量した。MEF2CとcTnTの免疫反応性を免疫蛍光法によって分析した。miR-199a-3pとその予測標的(MEF2C mRNAの3′非翻訳領域)間の相互作用をルシフェラーゼアッセイにより検証した。miR-199a-3pレベルは心臓発生時に増加した。miR-199a-3p阻害剤はEBの拍動速度を増加させ,心臓特異的マーカー(GATA4,Nkx2.5,cTnT,およびa-MHC)の発現を促進した。特に,miR-199a-3p阻害はMEF2Cのアップレギュレーションをもたらし,これはmiR-199a-3pの標的であり,実験的に予測し検証した。加えて,MEF2C siRNAは,miR-199a-3p阻害剤が,EB拍動を促進し,miR-199a-3p阻害剤が誘導するcTnTとMEF2C発現を低下させた。上記の結果は,MEF2CがmiR-199a-3p阻害剤による幹細胞の心筋細胞への分化を促進する過程に関与していることを示した。Copyright 2019 Wiley Publishing Japan K.K. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子発現  ,  細胞生理一般 

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