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J-GLOBAL ID：201902266029084327   整理番号：19A2559858

全細胞および単離ミトコンドリアのマイクロ呼吸測定【JST・京大機械翻訳】

Micro-respirometry of whole cells and isolated mitochondria

著者 (11件)： Levitsky Yan (Department of Chemistry, Michigan State University, 578 S Shaw Lane, East Lansing, MI 48824, USA. [e-mail]) ,  Pegouske David J. ,  Hammer Sandra S. ,  Frantz Nathan L. ,  Fisher Kiera P. ,  Muchnik Artem B. ,  Saripalli Anand R. ,  Kirschner Philip ,  Bazil Jason N. ,  Busik Julia V. ,  Proshlyakov Denis A.
資料名： RSC Advances (Web)  (RSC Advances (Web))
巻： 9  号： 57  ページ： 33257-33267  発行年： 2019年 
JST資料番号： U7055A  ISSN： 2046-2069  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 酸素消費は好気性生物における代謝の重要な指標である。現在の呼吸測定法は,高い試料需要,大気中O_2との交換,および使用可能な組織の制限された選択,複雑なデータ解釈,および制限された実験計画をもたらす累積滴定プロトコルのような限界にもかかわらず,精液発見をもたらした。好気性環境から干渉することなく,種々の生物学的試料によるO_2消費速度をマイクロリットル体積で測定する高感度でカスタマイズ可能な方法を開発した。著者らは,感光性高分子のO_2透過性がポリエーテルエーテルケトン(それぞれ0.125対0.143barer)のそれに匹敵し,酸素侵入に対する効率的な障壁を提供することを実証した。高分解能3D印刷と組み合わせたVerocCの光学的透明性により,密閉試料におけるオプトデベース酸素検出が可能になった。これらの特性はO_2消費速度に対して100×ダイナミックレンジ以上のマイクロ呼吸計をもたらす。重要なことに,材料の封入された呼吸計構成と非常に低い酸素透過性は,各細胞型に必要な高圧,生理的または低酸素条件を含む任意の[O_2]におけるO_2消費速度の定量的評価のために,樹脂プレコンディショニングに適している。著者らは,可溶性酵素,分離したミトコンドリア,懸濁液における細胞および培養した接着細胞を研究するために,2つの構成を特性化した。改良された感度により,数100個の細胞だけで呼吸のルーチンの定量的検出が可能になった。マイクロ呼吸計における細胞懸濁液の比活性は,高分解能ポーラログラフィーにより得られたものと非常に良く一致した。接着細胞プロトコルは,網膜色素上皮細胞,ARPE-19における呼吸の生理学的に関連した評価を可能にし,それは懸濁液におけるそれらと比較してより低い代謝速度を示した。培地組成を交換することにより,細胞がシアン化物により一時的に阻害され,基礎O_2取込の99.6%がその除去により回復することを示した。この方法は,基礎研究と適用分野にわたる限られた試料量に関する新しい実験計画と精密測定に適している。Copyright 2019 Royal Society of Chemistry All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： キャラクタリゼーション ,  生理学 ,  *単離 ,  高感度 ,  実験計画法 ,  *ミトコンドリア ,  高分解能 ,  ポーラログラフィー ,  滴定 ,  懸濁液 ,  可溶性 ,  酸素 ,  呼吸計 ,  酸素欠乏 ,  酵素

分類 (2件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  循環系の基礎医学  (GJ01020K)

タイトルに関連する用語 (4件)： 全細胞 ,  単離 ,  ミトコンドリア ,  呼吸