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J-GLOBAL ID：201902269049708087   整理番号：19A1532322

組合せ希釈と高感度HPLC-ESI-MSを用いたArabidopsis thalianaにおけるチオール-ペプチドの特性化と定量化【JST・京大機械翻訳】

Characterization and quantification of thiol-peptides in Arabidopsis thaliana using combined dilution and high sensitivity HPLC-ESI-MS-MS

著者 (9件)： Bellini Erika (Dipartimento di Biologia, Universita di Pisa, Italy) ,  Bellini Erika (Dipartimento di Biologia, Universita di Roma “Tor Vergata”, Italy) ,  Borso Marco (Dipartimento di Patologia Chirurgica, Medica, Molecolare e Dell’Area Critica, Universita di Pisa, Italy) ,  Betti Camilla (Dipartimento di Medicina, Universita di Perugia, Italy) ,  Bruno Laura (Dipartimento di Biologia, Universita di Roma “Tor Vergata”, Italy) ,  Andreucci Andrea (Dipartimento di Biologia, Universita di Pisa, Italy) ,  Ruffini Castiglione Monica (Dipartimento di Biologia, Universita di Pisa, Italy) ,  Saba Alessandro (Dipartimento di Patologia Chirurgica, Medica, Molecolare e Dell’Area Critica, Universita di Pisa, Italy) ,  Sanita di Toppi Luigi (Dipartimento di Biologia, Universita di Pisa, Italy)
資料名： Phytochemistry  (Phytochemistry)
巻： 164  ページ： 215-222  発行年： 2019年 
JST資料番号： D0116B  ISSN： 0031-9422  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 還元型グルタチオン(GSH),γ-グルタミルシステイン(γ-EC)及びフィトケラチンのようなチオール-ペプチド化合物は植物において基本的な役割を果たすが,それらの分析的測定及び特性化はそれらの高い極性及び酸化傾向のために依然として問題がある。したがって,本研究では,14分の機器操作,γ-EC,GSH,及びフィトケラチン4までのフィトケラチンの同時分析のために,信頼性のある高感度HPLC-ESI-MS法を開発した。この分析法をモデル植物Arabidopsis thaliana(アブラナ科)のシュート及び根抽出物で検証し,GSH及びフィトケラチンの両方に対する特異的同位体標識内部標準及び外部キャリブレーションの標準を用いて正確な定量を保証した。この方法の性能において良好な直線性が観察され(R>0.99),チオール-ペプチド濃度において3桁以上のダイナミックレンジが得られた。MRMモードにおいて,チオール-ペプチドの検出感度は,γ-EC,GSH,フィトケラチン2,フィトケラチン3,及びフィトケラチン4に対して,それぞれ約16,6,7,13,10fmolに等しかった(各20μl注入)。この方法の再現性は,高い日内および日間精度と精度値によって確認された。回収率は738~91.0%の範囲で近似的に推定され,マトリックス効果評価は全ての検体がイオン化抑制を示すことを明らかにした。内部標準としてのチオール-ペプチドの安定同位体標識類似体の使用は特に注目された。それは,定量化過程の間に検体シグナルを正規化することによって,マトリックス効果と試料調製を通してのチオール-ペプチド損失の結果を克服するかなりの利点を提供した。したがって,方法の感度,精度,再現性,安定性,回収率,およびマトリックス効果を検証することによって,データ信頼性とロバスト性を確実にした。Copyright 2019 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： マトリックス効果 ,  試料調製 ,  回収率 ,  *キャラクタリゼーション ,  *ペプチド ,  再現性 ,  *Arabidopsis ,  *高感度 ,  同時分析 ,  イオン化 ,  *高速液体クロマトグラフィー ,  酸化 ,  *Arabidopsis thaliana
準シソーラス用語： 同位体標識 ,  フィトケラチン , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (9件)： Arabidopsis thaliana(アブラナ科) ,  カドミウム ,  グルタチオン ,  重金属 ,  HPLC-ESI-MS ,  同位体標識内部標準 ,  質量分析 ,  フィトケラチン ,  チオール-ペプチド

分類 (3件)： 植物の生化学  (EH01050J) ,  植物に対する影響  (EE05030G) ,  植物生理学一般  (EH02010Y)

タイトルに関連する用語 (9件)： 組合せ ,  希釈 ,  高感度 ,  HPLC-ESI-MS ,  Arabidopsis ,  チオール ,  ペプチド ,  特性化 ,  定量化