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J-GLOBAL ID：201902269430160955   整理番号：19A1804773

スクランブルされた鎖間ジスルフィド結合の同定と定量化を可能にするシステイン-SILAC質量分析 制御されたFab-ARM交換により生成された二重特異的IgGにおける天然重鎖ペアリングの保存【JST・京大機械翻訳】

Cysteine-SILAC Mass Spectrometry Enabling the Identification and Quantitation of Scrambled Interchain Disulfide Bonds: Preservation of Native Heavy-Light Chain Pairing in Bispecific IgGs Generated by Controlled Fab-arm Exchange

著者 (9件)： van den Bremer Ewald T. J. (Genmab, The Netherlands) ,  Labrijn Aran F. (Genmab, The Netherlands) ,  van den Boogaard Ramon (Genmab, The Netherlands) ,  Priem Patrick (Genmab, The Netherlands) ,  Scheffler Kai (Thermo Fisher Scientific GmbH, Germany) ,  Melis Joost P. M. (Genmab, The Netherlands) ,  Schuurman Janine (Genmab, The Netherlands) ,  Parren Paul W. H. I. (Department of Immunohematology and Blood Transfusion, Leiden University Medical Center, The Netherlands) ,  de Jong Rob N. (Genmab, The Netherlands)
資料名： Analytical Chemistry  (Analytical Chemistry)
巻： 89  号： 20  ページ： 10873-10882  発行年： 2017年 
JST資料番号： A0395A  ISSN： 0003-2700  CODEN： ANCHAM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 二特異抗体(bsAbs)は,二つの異なる抗原を結合する能力により,不均一で難分解性の疾患を計数するための最も汎用性のある有望な医薬品革新の一つである。研究を必要とするbsAb形成の1つの重要な品質属性は,bsAbフォーマットと生産プラットフォームに依存する様々な程度に起こり得る,同族の重い(H)鎖/軽い(L)鎖対の潜在的なランダム化である。高感度のそのようなHL鎖交換反応生成物の含有量を評価するために,質量分析によるジスルフィド架橋ペプチドの詳細な特性化を容易にする方法,細胞培養におけるアミノ酸(SILAC)を用いたシステイン安定同位体標識を開発した。この分析のために,抗体を13C_3,15N-システインで代謝的に標識し,制御Fab-アーム交換(Duobody技術)により異なる二特異的分子の包括的パネルに組み込んだ。この技術は,いくつかが臨床に進歩した二特異的治療的IgGsの生成のための後生産法である。ここでは,単一重鎖ドメイン変異を含む2つの親抗体を混合し,それらが重光(HL)鎖対を交換してbsAbsを形成する制御還元条件を受ける。続いて,還元剤は除去され,すべてのジスルフィド架橋は再酸化され,共有結合性の鎖間および鎖内結合を再構成した。「左腕」と「右腕」HL鎖間ジスルフィドペプチドの両方の特性化に焦点を合わせて,多重レベル(Top-Middle-Bottom-Up)アプローチを行い,制御されたFabアーム交換により生成されたbsAbsの全パネルにおいて天然HL対合が保存されていることを観察した。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *質量分析 ,  多重化 ,  パネル ,  ヒト ,  アーム ,  還元 ,  代謝 ,  *重鎖 ,  *免疫グロブリンG ,  抗原 ,  再構成 ,  ペプチド ,  抗体 ,  キャラクタリゼーション ,  脂肪族アミン ,  チオール ,  脂肪族カルボン酸 ,  含硫アミノ酸 ,  第一アミン
準シソーラス用語： ジスルフィド架橋 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (2件)： 分子構造  (EB03020Y) ,  質量分析  (CC03013N)

物質索引 (1件)： システイン

タイトルに関連する用語 (10件)： ジスルフィド結合 ,  同定 ,  定量化 ,  システイン ,  SILAC ,  質量分析 ,  IgG ,  重鎖 ,  ペアリング ,  保存