抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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目的:ヒト子宮頸癌組織におけるSlit2とその受容体Robo1の発現及び子宮頸癌細胞のアポトーシスへの影響と潜在的機序を研究する。【方法】Slit2,Robo1およびBcl-2のmRNAおよび蛋白質発現を,リアルタイム蛍光定量的ポリメラーゼ連鎖反応(re-altimePCR)およびウェスタンブロット法によって,それぞれ20例の正常な頸部上皮(NCE)において検出した。40例の子宮頸部上皮内腫瘍(CIN)、60例の子宮頸部扁平上皮癌(SCC)組織における発現状況。トランスフェクション試薬Lipofectamine2000を用いて,HeLa細胞をsiRNA(沈黙群)にトランスフェクションした。プラスミド(過発現群)とpCMV-HAプラスミド(pCMV-HA対照)と単純トランスフェクション無相関siRNA配列の対照群(陰性対照)に、特定の時間の後に細胞を収集し、その後の実験に用いる。アネキシンV/PI染色の後,フローサイトメトリーを用いて,アポトーシスに及ぼすRobo1過剰発現とSlit2サイレンシングの影響を検出し,アポトーシス指数PARP-1の剪断とBcl-2発現をウェスタンブロット法によって検出した。【結果】NCE,CINおよびSCCにおけるSlit2mRNAの相対的な発現レベルは,それぞれ,2.48±0.36,1.78±0.22,1.45±0.17および2.69±0.31,1であった。94±0.21,1.48±0.15,Bcl-2は1.61±0.21,2.22±0.23,2.85±0.28で,有意差があった(P<0.05)。過剰発現群とpCMV-HA対照群におけるRobo1の相対的な発現レベルは,それぞれ3.48±0.51,1.00±0.14であり,有意差があった(P<0.05)。過剰発現群の早期アポトーシス、末期アポトーシスと総アポトーシス率はそれぞれ(7.81±0.80)%、(14.22±1.80)%と(23.11±2.02)%で、pCMV-HA群の早期アポトーシス、末期アポトーシスと総アポトーシス率はそれぞれ(2.60±0.82,7.33±0.81および9.91±1.72%であり,有意差があった(P<0.05)。沈黙群と陰性対照群のSlit2は,それぞれ1.00±0.11と0.51±0.12であり,有意差があった(P<0.05)。陰性対照細胞の早期アポトーシス、末期アポトーシスと総アポトーシス率はそれぞれ(4.91±1.12)%,(7.90±1.01)%,(12.80±1.70)%であった。沈黙群はそれぞれ(2.82±1.01)%,(5.13±2.10)%,(7.92±1.90)%で,統計学的有意差があった(P<0.05)。結論:Slit2/Robo1は子宮頸がん組織において異常に低い発現を呈し、細胞アポトーシスに抵抗し、子宮頸がんの発生発展において重要な役割を発揮する。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】