抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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背景:骨髄間葉系幹細胞は中胚葉由来の多能性幹細胞として、間葉系細胞、例えば骨芽細胞、脂肪細胞と軟骨細胞に分化できるほか、神経分化ポテンシャルを持ち、広い応用前景を有する。目的:グリア細胞由来神経栄養因子による体外誘導骨髄間葉系幹細胞のニューロン様細胞への分化の可能性を検討する。方法:健康なSDラットを用い、全骨髄接着法で骨髄間葉系幹細胞を体外培養、精製し、フローサイトメトリーにより細胞表現型鑑定を行った。成長状態が良い第4世代骨髄間葉系幹細胞を実験グループ分けした。対照群にはいかなる誘導剤も添加しなかった。実験群の培養液にグリア細胞由来栄養因子を添加し、濃度はそれぞれ20、50、100μg/Lに調整し、倒立位相差顕微鏡で細胞の成長状況と形態変化を観察した。6,12,24,48,72時間誘導し,免疫組織化学によりネスチンとニューロン特異性エノラーゼの発現を検出した。結果と結論;1.初代抽出で得られた骨髄間葉系幹細胞の形態均一性は良好であり、フローサイトメトリーの結果、CD44、CD90は強い陽性発現を呈し、CD34、CD45の陽性発現率は低かった。2.グリア細胞由来栄養因子の誘導後、細胞体は次第に細胞核に収縮し、変形細胞は次第に増加し、双極、多極と錐体などの典型的なニューロン様細胞形態が現れ、細胞縁に突起が現れ、隣接細胞突起と次第に相互に連結する。3グリア細胞由来栄養因子誘導6h後にネスチン発現陽性が現れ、24h後にピークに達し、50、100μg/Lグリア細胞由来栄養因子グループのネスチン発現は20μg/Lグリア細胞由来栄養因子グループより明らかに高かった。グリア細胞由来栄養因子による12時間誘導後,ニューロン特異性エノラーゼ発現陽性が検出され,発現強度は時間とともに増加し,48時間後にピークに達し,50であった。100μg/Lグリア細胞由来栄養因子群のネスチン発現は20μg/Lグリア細胞由来栄養因子群より高かった。対照群では明らかなニューロン様細胞の形態変化及び特異性マーカーの陽性発現は見られなかった。4結果により、ラット骨髄間葉系幹細胞は全骨髄接着法により体外で初代抽出分離及び継代培養を行い、グリア細胞由来栄養因子誘導後、ニューロン様細胞への分化の潜在力があることが分かった。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】