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J-GLOBAL ID：201902281253694567   整理番号：19A2524088

獣医診断研究室において一般的に使用される哺乳類細胞株の迅速種認証のための従来型およびリアルタイムPCRアッセイの開発【JST・京大機械翻訳】

Development of conventional and real time PCR assays for rapid species authentication of mammalian cell lines commonly used in veterinary diagnostic laboratories

著者 (3件)： Das Amaresh (Reagents and Vaccine Services Section, Foreign Animal Disease Diagnostic Laboratory, Plum Island Animal Disease Center, National Veterinary Services Laboratories, U.S. Department of Agriculture, Greenport, NY, USA) ,  Xu Lizhe (Reagents and Vaccine Services Section, Foreign Animal Disease Diagnostic Laboratory, Plum Island Animal Disease Center, National Veterinary Services Laboratories, U.S. Department of Agriculture, Greenport, NY, USA) ,  Jia Wei (Reagents and Vaccine Services Section, Foreign Animal Disease Diagnostic Laboratory, Plum Island Animal Disease Center, National Veterinary Services Laboratories, U.S. Department of Agriculture, Greenport, NY, USA)
資料名： Research in Veterinary Science  (Research in Veterinary Science)
巻： 126  ページ： 170-177  発行年： 2019年 
JST資料番号： W1679A  ISSN： 0034-5288  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 哺乳類細胞系は生物医学分野における価値あるツールであり,疾患診断から生物学的試薬とワクチンの生産までの応用がある。ここでは,動物学的診断研究室で広く使用されているブタ,緑サル,ハムスターおよびウシ組織由来のいくつかの哺乳類腎臓細胞株の種同定のための新しい従来型(cPCR)およびリアルタイムPCR(qPCR)アッセイの開発について報告する。PCRプライマーとプローブを高度に保存されたミトコンドリア遺伝子から選択し,標的特異性を確実にするためにバイオテクノロジー情報(NCBI)ウェブサイトのための国立センターにおけるヌクレオチドBLASTによってin silicoで分析した。アッセイは高度に種特異的であり,異なる哺乳類種由来の他の試験細胞系に対して交差反応性を持たなかった。アッセイ感度(検出限界;LOD)を,鋳型として細胞系DNAの連続希釈を用いて測定した。推定されたLODsは,cPCRに対して2.95と48pg(ピコグラム)DNA/アッセイの間にあり,qPCRに対して1.5×10~-3と4.8×10~2pg DNA/アッセイの間にあった。多重qPCR分析を,単一アッセイにおける3種までの同時検出のために開発した。多重qPCRアッセイは,感受性の10~100倍の低下を示す緑のサル種を除いて,対応する単一プレックスアッセイと同じ感度を示した。ブタ細胞の汚染は,ウサギ細胞系の1つで検出された。汚染はSangerとNext-generationシークエンシングによってさらに確認された。Copyright 2019 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ワクチン ,  プローブ ,  定量的PCR法 ,  ハムスター ,  *診断 ,  *哺乳類 ,  ヌクレオチド ,  *リアルタイムPCR法 ,  感受性 ,  多重化 ,  DNA【核酸】
準シソーラス用語： 配列解析 ,  同時検出 ,  *細胞株 ,  特異性 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 哺乳類細胞株 ,  従来型およびリアルタイムPCR ,  種認証 ,  Sangerと次世代シークエンシング ,  種汚染

分類 (2件)： 豚  (FD02040U) ,  ウイルスによる動物の伝染病  (FE02024R)

タイトルに関連する用語 (9件)： 獣医 ,  診断 ,  研究 ,  哺乳類 ,  細胞株 ,  認証 ,  リアルタイムPCR ,  アッセイ ,  開発