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J-GLOBAL ID:201902282094546910   整理番号:19A1804760

ISRTAによる細胞膜蛋白質の超高感度定量【JST・京大機械翻訳】

Ultrasensitive Quantitation of Plasma Membrane Proteins via isRTA
著者 (8件):
資料名:
巻: 89  号: 20  ページ: 10776-10782  発行年: 2017年 
JST資料番号: A0395A  ISSN: 0003-2700  CODEN: ANCHAM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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細胞膜蛋白質(PMP)の定量は基礎的であり,実験室で日常的に行われている。しかしながら,脂質膜におけるPMPsの固有/相互作用ヘテロ構造と複雑な環境により挑戦されるので,PMPに対する定量的技術はしばしば複雑な処理(例えば,標識,単離,精製,測定)を必要とし,感度は通常は満足できない。この問題を解決するために,著者らは,簡単な操作とより多くの流線型において,極端に高い感度でPMPの定量を可能にする新しい方法を提案した。この方法は,in situ圧延サイクル複製テンプレート増幅戦略(isRTA)の設計に基づいている。実際に,2ラウンドのDNAカスケード等温増幅を行った。増幅の最初のラウンドは,増幅の2番目のラウンドのためにテンプレートを提供することができた。このように,定量的信号の著しい強化を達成することができた。この方法で,PMPを超高感度で定量化した。細胞当たり25コピーのPMPを検出できた。さらに,isRTAの利点は,乳癌細胞上の広い分布範囲にわたって発現されるいくつかのPMPバイオマーカー(MUC1,EpCAM,およびHER2)の同時同定によって示されている。したがって,乳癌細胞サブセットの正確なタイピングは,「定量的から定性的」戦略のために可能である。したがって,isRTA法の前例のない感度と高い利用性は,多くの研究分野における膜蛋白質への剥離とそれらの関連する生物機能に対する重要な展望を提示する可能性がある。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分光分析 
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