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J-GLOBAL ID:201902287078596517   整理番号:19A1804671

サイトゾルおよび小胞体におけるFRETセンサ機能性の重要な比較およびイオンの定量化に対する意味【JST・京大機械翻訳】

Critical Comparison of FRET-Sensor Functionality in the Cytosol and Endoplasmic Reticulum and Implications for Quantification of Ions
著者 (10件):
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巻: 89  号: 17  ページ: 9601-9608  発行年: 2017年 
JST資料番号: A0395A  ISSN: 0003-2700  CODEN: ANCHAM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)に基づく遺伝的にコード化されたセンサは,生細胞中の検体の定量と可視化のための強力なツールであり,オルガネラに標的化されると,細胞の異なる部分における検体の分布を定義する可能性がある。しかし,検体分布の定量的推定は,異なる場所におけるセンサ機能性の厳密で系統的な分析を必要とする。本研究では,異なるオルガネラにおけるセンサ性能を批判的に評価する方法を確立し,細胞亜鉛イオン(Zn2+)を定量化するための3つの異なる遺伝的にコード化されたセンサプラットフォームのサイドバイサイド比較を行った。キャリブレーション条件を高ダイナミックレンジと安定FRET信号に対して最適化した。数時間で数千の細胞をスクリーニングすることができる単一細胞顕微鏡と新規マイクロ流体プラットフォームの組み合わせを用いて,HeLa細胞のERと比較してサイトゾルにおけるこれらのセンサの異なる性能を観察し,ERにおけるセンサの酸化的オリゴマーの形成を同定した。最後に,試験管と生細胞の両方におけるこれらのセンサの結合パラメータを再評価するための新しい方法を用いた。最終的に,センサ応答は異なる細胞環境により影響され,オルガネラ標的化センサの将来世代を評価するための枠組みを提供することを示した。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
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分光分析  ,  細胞生理一般  ,  生体の顕微鏡観察法 

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