転写因子をコードする合成mRNAによるヒト胚幹細胞の膵臓内分泌細胞への分化のための迅速でフットプリントのないプロトコルの確立【JST・京大機械翻訳】

Ida Hideomi; Ida Hideomi; Akiyama Tomohiko; Ishiguro Keiichiro; Goparaju Sravan K.; Nakatake Yuhki; Chikazawa-Nohtomi Nana; Sato Saeko; Kimura Hiromi; Yokoyama Yukihiro; Nagino Masato; Ko Minoru S. H.; Ko Shigeru B. H.

文献

J-GLOBAL ID：201902287180244739 整理番号：19A0791613

転写因子をコードする合成mRNAによるヒト胚幹細胞の膵臓内分泌細胞への分化のための迅速でフットプリントのないプロトコルの確立【JST・京大機械翻訳】

Establishment of a rapid and footprint-free protocol for differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endocrine cells with synthetic mRNAs encoding transcription factors

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資料名：
巻： 9 号： 1 ページ： 277 発行年： 2018年
JST資料番号： U7397A ISSN： 1757-6512 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：イギリス (GBR) 言語：英語 (EN)

胚性幹細胞(ESC)または人工多能性幹細胞(iPSC)のような多能性幹細胞(hPSC)からin vitroで発生した膵臓β細胞の移植は,糖尿病の代替療法として提案されている。この目的のために多くの分化プロトコルが開発されているが,転写因子(TF)-Pdx1およびNKX6.1-のレンチウイルス媒介強制発現は,その比較的速くて直接的なアプローチのための最前線にあった。しかしながら,このような細胞が将来の治療目的に使用されることを考慮すると,DNAの変化が腫瘍形成性のような影響に関して,DNAの変化が意図されていないので,ゲノム上にいかなるフットプリントも残さない手順を開発することが望ましい。本研究では,PDX1とNKX6.1をコードする合成mRNA(synRNA)を用いることにより,膵臓内分泌系への迅速でフットプリントのないhESC分化のための新しいプロトコルを確立することを試みた。また,多能性遺伝子POU5F1(OCT4として知られている)の発現を減少させるsiPOU5F1が,中胚葉と内胚葉系統について以前に報告されたように分化を増強できるかどうかを試験した。siRNA-PDX1とsynRNA-NKX6.1を,修飾分化培養条件でリポフェクション試薬により5回形質移入した。siPOU5F1は最初のトランスフェクションにのみ含まれた。続いて,細胞を低付着プレート上に播種し,眼窩シェーカーにより凝集した。13日目に,分化の程度は,インシュリン,グルカゴンおよびソマトスタチンのような内分泌ホルモンに対する定量的RT-PCR(qRT-PCR)および免疫組織化学により評価した。PDX1とNKX6.1の両方の発現は,3日目にsynRNA-PDX1とsynRNA-NKX6.1を共トランスフェクションした細胞で検出された。13日目のトランスフェクション細胞におけるインシュリンの発現レベルは,0日目のレベルおよびsynRNAトランスフェクションなしで培養された細胞に比べて,qRT-PCRによりそれぞれ450倍および14倍高かった。免疫組織化学的に,膵臓内分泌ホルモンはsynRNAトランスフェクションなしで培養された細胞では検出されなかったが,syn-PDX1,synRNA-NKX6.1およびsiPOU5F1でトランスフェクションされた細胞では13日目に高度に発現された。本研究では,hESCの内分泌細胞への迅速でフットプリントのない分化のための新しいプロトコルを報告する。Copyright 2019 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

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細胞生理一般

引用文献 (20件)：

Cell; Generation of functional human pancreatic beta cells in vitro; FW Pagliuca, JR Millman, M Gurtler, M Segel, A Van Dervort, JH Ryu, QP Peterson, D Greiner, DA Melton; 159; 2; 2014; 428-439; 10.1016/j.cell.2014.09.040; citation_id=CR1
Nat Biotechnol; Production of pancreatic hormone-expressing endocrine cells from human embryonic stem cells; KA D'Amour, AG Bang, S Eliazer, OG Kelly, AD Agulnick, NG Smart, MA Moorman, E Kroon, MK Carpenter, EE Baetge; 24; 11; 2006; 1392-1401; 10.1038/nbt1259; citation_id=CR2
EMBO J; Controlled induction of human pancreatic progenitors produces functional beta-like cells in vitro; HA Russ, AV Parent, JJ Ringler, TG Hennings, GG Nair, M Shveygert, T Guo, S Puri, L Haataja, V Cirulli; 34; 13; 2015; 1759-1772; 10.15252/embj.201591058; citation_id=CR3
Stem Cell Res; Cell aggregation optimizes the differentiation of human ESCs and iPSCs into pancreatic bud-like progenitor cells; T Toyoda, S Mae, H Tanaka, Y Kondo, M Funato, Y Hosokawa, T Sudo, Y Kawaguchi, K Osafune; 14; 2; 2015; 185-197; 10.1016/j.scr.2015.01.007; citation_id=CR4
Nat Commun; A programmable synthetic lineage-control network that differentiates human IPSCs into glucose-sensitive insulin-secreting beta-like cells; P Saxena, BC Heng, P Bai, M Folcher, H Zulewski, M Fussenegger; 7; 2016; 11247; 10.1038/ncomms11247; citation_id=CR5

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