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J-GLOBAL ID：201902298440217102   整理番号：19A1256117

MSTNノックアウトマウスの発生のためのCRISPR/Cas9とTALENの遺伝子編集効率の比較【JST・京大機械翻訳】

Comparison of gene editing efficiencies of CRISPR/Cas9 and TALEN for generation of MSTN knock-out cashmere goats

著者 (11件)： Zhang Ju (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Liu Jian (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Yang Wenliang (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Cui MengLan (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Dai Bai (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Dong Yanhua (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Yang Jie (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Zhang Xiaomeng (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Liu Dongjun (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Liang Hao (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China) ,  Cang Ming (State Key Laboratory of Reproductive Regulation & Breeding of Grassland Livestock, School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot, 010070, China)
資料名： Theriogenology  (Theriogenology)
巻： 132  ページ： 1-11  発行年： 2019年 
JST資料番号： A1189A  ISSN： 0093-691X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ゲノムエディタCRISPR/Cas9(クラスタ化された規則的に間隔をあけた短いパリンドロミックリピート/Cas9ヌクレアーゼ-ヌル)とTALENs(転写活性化因子様エフェクタヌクレアーゼ)は,哺乳類ゲノムの標的化修飾のために一般的に使用されている。今日まで,ヤギ育種のためのゲノム編集におけるCRISPR/Cas9とTALENの使用間の差異を調べるための比較研究はほとんど行われていない。ここでは,骨格筋細胞の増殖と分化を負に調節する,Alpasカシミアヤギミオスタチン(MSTN)遺伝子のノックアウト(KO)を生成するために,CRISPR/Cas9とTALEN技術を複数のレベルで比較した。CRISPR/Cas9を用いて観察された電気トランスフェクション効率は,MSTN KO細胞を生成するためにTALENを用いて観察されたものより8.1%多かった。加えて,MSTN遺伝子のエキソン1を編集するためのCRISPR/Cas9の切断効率は,TALENのそれより高かった。しかしながら,CRISPR/Cas9システムのオフターゲット効果も,TALENのそれらより高かった。さらに,CRISPR/Cas9によるMSTN-/-突然変異を得る頻度は,TALENによるそれより8.5倍高いことを見出した。CRISPR/Cas9編集コロニーは,TALEN編集コロニー(13bpまで)より長い欠失(117bpまで)を含んだ。著しいことに,体細胞核移植によりクローン化ヤギを発生させるために用いた胚を比較したところ,TALEN MSTN KO胚は8細胞に容易に発達し,それらの切断率はCRISPR/Cas9編集胚のそれよりも有意に高かった。最後に,CRISPR/Cas9を用いてMSTN KOラムを作製し,CRISPR/Cas9を用いてヤギにおいて高レベルの標的遺伝子修飾を達成できることを示唆した。まとめると,本研究はTALENが種々のゲノム修飾を可能にし,CRISPR/Cas9よりもいくつかの利点を有する可能性があるが,後者は正確で効率的な遺伝子編集を可能にすることにより有意な利点を提供することを示した。したがって,CRISPR/Cas9は,農場動物の育種における応用のためのロバストな遺伝子工学ツールになる可能性がある。Copyright 2019 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： クラスタ化 ,  *遺伝子 ,  *型ばらし ,  コロニー ,  ヌクレアーゼ ,  *ノックアウトマウス ,  *編集 ,  突然変異 ,  ターゲティング ,  育種 ,  クローン
準シソーラス用語： ゲノムエディティング ,  *TALEN ,  *Cas9 ,  *CRISPR配列 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： CRISPR/Cas9 ,  TALEN ,  ミオスタチン(MSTN) ,  ノックアウト ,  ヤギ ,  体細胞核移植

分類 (5件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  発生と分化  (EJ16020W) ,  豚  (FD02040U) ,  牛  (FD02020Y) ,  遺伝子の構造と化学  (EC02020U)

タイトルに関連する用語 (5件)： ノックアウトマウス ,  CRISPR ,  Cas9 ,  TALEN ,  遺伝子編集